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鉴别6种常见食用肉类的多重PCR检测体系的构建及验证

Establishment and Validation of a Multiplex PCR Detection System for the Identification of Six Common Edible Meat Components

摘要:

目的 建立一种快速、准确、灵敏的多重PCR检测方法,用于同时鉴别6种常见食用肉类(牛、羊、鸡、猪、鹅、鸭),并评估其在肉类食品掺假鉴定中的应用价值.方法 基于GenBank数据库中6个物种的线粒体全基因组序列,筛选具有种内保守性、种间特异性的DNA序列(牛16S rRNA、羊COX-1、鸡Cytb、猪COX-1、鹅NADH2、鸭16S rRNA),并设计物种特异性引物,以此构建一个可同时鉴别6种常见食用肉类的多重PCR检测体系.对该体系进行种属特异性、灵敏度和重复性研究,并进行模拟混合样品检测.结果 成功构建了一个可同时鉴别6种常见食用肉类的多重PCR检测体系,该体系在非目标物种的DNA中均未有效扩增;在DNA模板量为0.0625~2 ng/μL时,6个物种的扩增产物均能检见.在鸭肉和牛肉混合比例低至0.5%时,仍能检测到鸭肉成分.结论 本研究构建了一个特异性强、灵敏度高、重复性好的多重PCR检测体系,可准确鉴别6种常见食用肉类食品中的动物源性成分,为我国常见食用肉类及肉制品的掺假鉴定提供了一种简单、实用的检测技术.

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作者: 蒋志伟 [1] 夏若成 [2] 陶瑞旸 [2] 李成涛 [1]
作者单位: 温州医科大学基础医学院法医学系,浙江 温州 325035;司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 司法部司法鉴定重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063 [1] 司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 司法部司法鉴定重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063 [2]
期刊: 《法医学杂志》2024年40卷3期 254-260页 MEDLINEISTICCSCD
分类号: R89DF795.2D919.2
栏目名称: 论著
DOI: 10.12116/j.issn.1004-5619.2023.531002
发布时间: 2024-09-11
基金项目:
国家自然科学基金 上海市法医学重点实验室资助项目 司法部司法鉴定重点实验室开放课题 上海市司法鉴定专业技术服务平台资助项目
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