换一批
换一批毒害艾美耳球虫疫苗ENYS株TaqMan qPCR检测方法的建立
Methodology Development of TaqMan qPCR for E.necatrix Vaccine ENYS Strain
摘要：
为了对E.necatrix ENYS株在生产中进行质控及对临床应用效果的监测,该研究对ENYS株和ENGD株进行全基因组重测序,结合生物信息学分析建立了一种TaqMan qPCR检测技术.结果显示,En-marker5测序结果与预期相符,最优的引物浓度和探针浓度分别为500 nM和250 nM,标准曲线的斜率为-3.249,相关系数为0.999,可以通过Ct值对模板浓度定量,该方法检测下线为290个拷贝/反应和50个卵囊/反应,灵敏度是传统PCR的10倍;该方法可以特异性检测EnYS株,不能扩增其他种的疫苗株和野毒株以及肠道病原菌;重复性检测的变异系数小于0.6%,重复性良好.本研究针对E.necatrix EnYS株开发了一种灵敏度高、特异性强、稳定性好的TaqMan qPCR检测方法,为E.necatrix EnYS株的安全性评估及临床应用提供技术支持.
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作者：
作者单位：
佛山科学技术学院,广东佛山 528231;广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东广州 510640
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广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东广州 510640
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佛山科学技术学院,广东佛山 528231
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期刊：
《广东畜牧兽医科技》2024年49卷4期 1-8页
关键词：
毒害艾美耳球虫减毒活疫苗全基因组重测序分子标记TaqMan qPCRE.necatrix.Attenuated live vaccineWhole genome resequencingMolecular markerTaqMan qPCR
分类号：
S852.7
栏目名称：
专家论坛
DOI：
10.19978/j.cnki.xmsy.2024.04.01
发布时间：
2024-08-27
基金项目：
广东省农业科学院协同创新中心项目
广东省畜禽疫病防治研究重点实验室项目
科技创新战略专项
广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项
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