基于转录组测序研究丹参酮ⅡA抑制小鼠睾丸细胞凋亡的作用
Mechanism Study on Tanshinone ⅡA Alleviating Heat Stress-Induced Testicular Cell Apoptosis in Mice Through Transcriptome Sequencing
[目的]研究丹参酮ⅡA(TSA)对热应激导致的小鼠睾丸损伤的影响及其作用机制.[方法]取60只C57小鼠随机分为空白对照组、热应激(HS)组和TSA低、中、高剂量组,每组12只.除空白对照组外,其余小鼠使用单次睾丸热应激处理构建睾丸损伤模型,分别于造模后第2 天开始,TSA低、中、高剂量组小鼠分别按10 μg/g、20 μg/g、40 μg/g的剂量腹腔注射溶解于二甲基亚砜(DMSO)的TSA溶液,HS组小鼠注射给予等容积的DMSO溶剂,连续干预7d.利用病理学、高通量测序及生物信息学分析、分子生物学技术等多种手段,研究TSA对热应激致小鼠睾丸损伤的影响及作用机制.[结果]与空白对照组比较,HS组小鼠睾丸曲细精管直径显著减小,睾丸组织内细胞凋亡显著增加,睾酮含量显著降低(P<0.05);与HS组比较,TSA干预后,小鼠睾丸曲细精管直径显著增大,睾丸组织内细胞凋亡显著减少,睾酮含量显著上升(P<0.05).通过高通量转录组测序,HS组与空白对照组、TSA中剂量组间的关键差异表达基因聚类于细胞凋亡信号通路;Western blot结果表明HS组通过上调细胞凋亡通路内蛋白表达导致细胞凋亡的发生,引起睾丸组织器质性病变,进而影响睾丸分泌功能;TSA干预后能够抑制细胞凋亡通路内蛋白表达,缓解由热应激导致的睾丸损伤.[结论]TSA能够有效缓解由热应激引起的小鼠睾丸损伤,其机制可能是通过抑制细胞凋亡而发挥作用.
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