胸腺素β4联合水胶体敷料对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合及p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的影响
Effects of thymosin β4 combined with hydrocolloid dressing on wound healing and p38 mitogen-activated protein kinase signal transduction pathway in rats with deep Ⅱ degree burn
目的 探讨胸腺素β4(thymosin β4,Tβ4)联合水胶体敷料对深Ⅱ度烧伤大鼠早期创面愈合及p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号传导通路的影响.方法 选取常规适应性喂养的健康Wister雄性大鼠40只作为研究对象,随机抽取10只作为对照组,其余30只按照随机数字表法分为烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组,每组10只.除对照组外,其余大鼠均制作深Ⅱ度烧伤模型,造模成功后进行后续试验,Tβ4+水胶体敷料组给予外涂6μgTβ4+安普贴贴敷,p38MAPK激动剂组给予外涂6μgTβ4+安普贴贴敷+外涂p79350(1 μg/kg),烧伤组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液外涂.给药3、7、10、14 d对创面进行拍照,采用MoticMed6软件及Photoshop软件处理照片并计算各组大鼠早期创面愈合率;免疫组织化学法检测创面肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)等炎症因子水平;逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测创面转化生长因子β1蛋白(transforming growth factor β1 protein,TGF-β1)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)检测p38MAPK信号传导通路关键蛋白p38MAPK、核因子 κB(nuclear factor κB,NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶 3(cysteine protease 3,caspase-3)表达情况.结果 给药3、7、10、14 d后,Tβ4+水胶体敷料组的创面愈合率均高于烧伤组和p38MAPK激动剂组(P<0.05).与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组各时点TNF-α、IL-10水平均较高(P<0.05);给药后12、24、48 h,烧伤组、p38MAPK激动剂组TNF-α水平高于Tβ4+水胶体敷料料组(P<0.05),IL-10水平低于Tβ4+水胶体敷料组(P<0.05);而烧伤组、p38MAPK激动剂组各时点TNF-α、IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组各时间点TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA表达均上调(P<0.05);与烧伤组比较,Tβ4+水胶体敷料组各时间点TGF-β1 mRNA表达均下调(P<0.05)、VEGF mRNA表达均上调(P<0.05);烧伤组、p38MAPK激动剂组各时间点TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,烧伤组、Tβ4+水胶体敷料组、p38MAPK激动剂组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量均较高(P<0.05);与烧伤组比较,Tβ4+水胶体敷料组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量均较低(P<0.05);但烧伤组、p38MAPK激动剂组p38MAPK、NF-κB、caspase-3蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).结论 胸腺素 β4联合水胶体敷料有助于促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,其机制可能与抑制p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路、降低炎性因子表达有关.
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