流式细胞术检测荧光素标记结核杆菌的方法
The method of detecting fluorescein-labeled tuberculosis by flow cytometry
目的:建立流式细胞术检测荧光素标记结核杆菌(M.tb)的方法.方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)、二乙酸荧光素(FDA)、PKH26 和碘化丙啶(PI)标记M.tb,应用流式细胞仪检测M.tb标记率.结果:FITC标记M.tb,在PBS缓冲液中,不同浓度FITC(10~40 μg/ml)标记率随浓度增加而增高,FITC浓度 10 μg/ml标记率为 85%,FITC浓度增加到 40 μg/ml标记率可达到 93%,差异具有统计学意义(P<0.05);而在CB缓冲液中,不同浓度FITC(10~40 μg/ml)标记M.tb标记率均在 90%左右,差异无统计学意义(P>0.05).FDA标记M.tb标记率均达到 92%以上.PKH26 标记M.tb标记率均达到 90%以上.PI标记M.tb,酒精作用 1 min标记率在 47%左右,酒精作用 2 min标记率达到 97%左右,且标记率随时间增加而增高(P<0.05).结论:建立流式细胞术检测荧光素标记M.tb的方法可为结核病基础研究提供实验思路.创新性建立应用荧光素FITC、FDA、PKH26、PI标记M.tb,并利用流式细胞术检测标记率,可为结核病基础研究提供实验思路.
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