WDR63促进人根尖牙乳头干细胞成神经分化功能
WDR63 promotes the neural differentiation potential of human apical papilla stem cells
目的:研究WD重复结构域 63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用.方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63 基因在成神经分化诱导 3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63 稳定过表达和敲低的SCAPs,通过类神经球形成实验对各组SCAPs进行神经分化诱导,对类神经球的直径进行定量分析,免疫荧光染色实验检测SCAPs中巢蛋白(Nestin)和βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)的表达,实时荧光定量PCR实验检测神经分化相关指标βⅢ-tubulin、神经源性分化蛋白(NeuroD)、神经细胞黏附分子(NCAM)和Nestin基因的表达.结果:未转染慢病毒SCAPs中WDR63 的表达量在成神经分化后的3、6、9 d逐渐增加(P<0.05);过表达WDR63 后,WDR63 基因(P<0.001)和蛋白表达增加,神经球直径增加(P<0.01),Nestin 和 βⅢ-tubulin 神经球样细胞荧光强度增加(P<0.01),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达升高(P<0.05);敲低WDR63 后,WDR63 基因(P<0.01)和蛋白的表达降低,神经球直径降低(P<0.05),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度减少(P<0.05),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达降低(P<0.05).结论:WDR63 可促进SCAPs的成神经分化功能.
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