中性粒细胞胞外诱捕网调控口腔鳞状细胞癌的发展及预后的相关研究
Neutrophil extracellular traps regulating the development and prognosis of oral squamous cell carcinomas
目的 探究中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carci-noma,OSCC)中的表达及作用.方法 通过免疫检测技术对OSCC组织中NETs的表达情况进行了确认,随后对不同NETs表达水平患者的临床病理特征及预后进行了分析.通过密度梯度离心法分离健康人外周血中性粒细胞并使用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导NETs生成,将其与OSCC细胞共培养后,通过CCK-8 细胞增殖实验检测OSCC细胞增殖能力的变化,通过Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测OSCC细胞迁移能力的变化;通过蛋白免疫印迹实验(Western blotting,WB)检测NETs对OSCC上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的调控.结果 NETs在OSCC中的表达水平高于正常组织(P<0.001),NETs高表达患者较NETs低表达患者预后更差(P<0.05),NETs表达水平与OSCC患者的临床分级、浸润和复发程度相关(P<0.05).NETs可促进Cal27 和HN6 细胞的增殖和迁移能力(P<0.05),抑制了上皮标志物的蛋白表达,并促进了间充质标志物的蛋白表达(P<0.05),这些作用可被NETs抑制剂DNaseⅠ逆转.结论 NETs在OSCC中高表达,其可通过影响上皮间充质转化促进OSCC细胞的增殖和迁移,并影响OSCC患者预后.
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