沉默STAT1对肠道病毒71型感染THP-1细胞的初步探讨
Preliminary Study on Silencing STAT1 in EV71 Infected-THP-1 Cells
目的 探讨EV71感染对THP-1细胞内转录因子STAT1、ISGs及STAT1基因敲减对ISGs和EV71复制变化的影响.方法 采用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测EV71感染人单核巨噬细胞(THP-1)后4种干扰素刺激基因ISG15、ISG56、OAS1、MXA的mRNA水平和IFN-β的产生,并采用Western blot分析转录因子STAT1磷酸化水平,利用慢病毒介导的特异性STAT1短发卡RNA干扰THP-1细胞STAT1的表达,观察STAT1基因沉默对4种干扰素刺激基因及EV71/VP1表达水平的影响.结果 EV71感染THP-1细胞后,IFN-βmRNA的相对表达量上调,并刺激了MXA、OAS1、ISG56 mRNA的表达和STAT1的磷酸化水平.慢病毒介导的shRNA-STAT1基因沉默后,与con-shRNA-STAT1组比,STAT1总蛋白及其磷酸化水平表达下降,MXA、OAS1、ISG56mRNA的表达量及EV71/VP1蛋白的表达水平降低.结论 STAT1基因沉默抑制EV71感染THP-1细胞内STAT1的磷酸化和ISGs的转录,并抑制EV71的感染.
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