换一批
换一批广东金钱草糖基转移酶基因DsUGT11的克隆和功能分析
Cloning and Functional Characterization of a Flavonoids UDP-Glycosyltransferase Gene DsUGT11 from Desmodium Styracifolia
摘要：
目的 对广东金钱草中参与黄酮类化合物生物合成途径的糖基转移酶基因DsUGT11展开研究,通过生物信息分析、基因克隆、原核表达等技术解析其编码蛋白的功能.方法 利用生物信息分析法分析和预测DsUGT11的序列特征和可能的生物功能,从新鲜叶片中提取RNA并反转录成cDNA,从中扩增和克隆得到DsUGT11基因,并通过异源表达和体外酶促反应对其编码蛋白的功能进行验证.结果 从广东金钱草的转录组中筛选鉴定了1个糖基转移酶基因DsUGT11,该基因的开放阅读框长度为1426 bp,编码蛋白分子量52.14 KDa.生物信息结果表明DsUGT11具有UGT家族特有的"PSPG"的保守基序.本研究成功扩增得到DsUGT11并将其克隆至原核表达载体pMALc5X中,接着成功诱导得到重组蛋白.体外酶促反应结果表明,DsUGT11可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成3种化合物,包括芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(又称大波斯菊苷,Apigetrin)和两个未知化合物.结论 本研究成功从广东金钱草中鉴定并克隆了DsUGT11基因,其编码蛋白是一个黄酮-氧糖苷转移酶,可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成大波斯菊苷等3种产物.
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作者：
作者单位：
广州中医药大学中药学院 广州 510006
[1]
广州中医药大学第一附属医院 广州 510045
[2]
广州中医药大学中药学院 广州 510006;中山市中智药业集团有限公司 中山 528437
[3]
期刊：
《世界科学技术-中医药现代化》2024年26卷6期 1553-1562页
ISTICPKUCSCD
关键词：
广东金钱草糖基转移酶生物信息分析原核表达Desmodium styracifoliaGlycosyltransferaseBioinformation analysisProkaryotic expression
分类号：
R-058
栏目名称：
中药学研究
DOI：
10.11842/wst.20231115003
发布时间：
2024-09-05
基金项目：
国家自然科学基金
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