换一批
换一批牦牛热休克蛋白B11通过抗凋亡缓解热应激对肾细胞的体外损伤
Yak heat shock protein B11 alleviates the damage of kidney cells induced by heat stress in vitro through anti-apoptosis
摘要：
热休克蛋白B11(Heat shock protein beta-11,HSPB11)是小热休克蛋白家族的成员之一,具有抗凋亡、促进细胞存活和维持细胞形态等功能.在热应激条件下,自噬失调是急性肾损伤、肾损伤修复不全及慢性肾脏疾病的发病机制之一,而肾细胞的基础自噬是维持肾脏稳态、结构和功能的关键.为探讨牦牛HSPB11对热应激牛肾细胞(Madin Darby Bovine Kidney,MDBK)活性和凋亡的作用,本研究将MDBK细胞分为对照组、热应激组和处理组,采用PCR扩增、生物信息学分析、原核表达载体构建、CCK-8法、吖啶橙染色法、荧光酶标仪检测、荧光定量PCR等方法.扩增得到牦牛HSPB11目的片段757 bp;构建的系统进化树显示,牦牛与黄牛HSPB11的相似性高达99％;成功构建pET-32a-HSPB11重组质粒,表达获得约35 kDa的牦牛HSPB11;筛选得到牦牛HSPB11最佳浓度为10.0μg/mL,作为处理组HSPB11浓度.研究结果显示,对照组细胞相对活性极显著高于热应激组(P=0.004),处理组细胞相对活性极显著高于热应激组(P＜0.001).热应激组细胞出现收缩、细胞核裂解呈现碎片状,处理组少见细胞裂解.此外,热应激组MDBK细胞核酸荧光强度均极显著高于对照组和处理组(P＜0.001).热应激组caspase-3、caspase-9、Bcl-2的mRNA表达量极显著高于对照组和处理组(P＜0.001).综上,推测牦牛HSPB11通过凋亡途径缓解热应激对MDBK细胞损伤,为探究牦牛HSPB11的功能提供基础资料.
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作者：
作者单位：
西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室,成都 610041
[1]
甘孜州雅江县农牧农村和科技局,雅江 627450
[2]
四川畜牧科学研究院,成都 610066
[3]
期刊：
《兽类学报》2024年44卷4期 489-496页
MEDLINEISTICPKUCSCDBP
分类号：
Q753
栏目名称：
研究论文
DOI：
10.16829/j.slxb.150842
发布时间：
2024-08-09
基金项目：
四川省科技厅科研项目
西南民族大学中央高校基本科研业务费专项
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