火炭母提取物激活NF-κB抑制AMPK通路诱导人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡研究
Study on the apoptosis induction of human ovarian cancer SK-OV-3 cells by activating NF-κB and inhibiting AMPK pathway with extracts from polygonum chinense
目的 研究火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 利用乙酸乙酯萃取火炭母有效成分,用MTT法检测火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,利用蛋白质印迹法检测核转录因子κB(NF-κB)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路相关蛋白.结果 火炭母乙酸乙酯提取物能够抑制人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖能力,且抑制率与处理浓度和时间增加而增强,火炭母浓度为10 mg/L时,24、48和72 h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为3.37%、4.21%及5.51%;火炭母浓度为100 mg/L时,24、48和72 h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为38.86%、45.86%及54.54%;火炭母浓度为1 000 mg/L时,24、48和72 h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为65.39%、73.76%及84.97%,差异有统计学意义,均P<0.01.0、10、20、50、100、1 000 mg/L的火炭母乙酸乙酯提取物作用于人卵巢癌SK-OV-3细胞后24 h使用流式细胞术检测细胞凋亡率P值分别为0.977、0.013、0.008、0.003和0.012,显示20 mg/L以上的火炭母乙酸乙酯提取物处理导致SK-OV-3细胞凋亡率显著升高.蛋白质印记法实验结果表明,随火炭母乙酸乙酯提取物处理浓度增加,SK-OV-3细胞NF-κB p65蛋白表达水平升高,而AMPK蛋白表达水平下降.结论 火炭母乙酸乙酯提取物可能通过激活NF-KB通路,抑制AMPK蛋白的表达,诱导人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡.火炭母乙酸乙酯提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞的毒性作用呈明显的剂量依赖性和时间依赖性.
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