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本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)Erns蛋白,并分析其免疫原性.以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建 BVDV Erns蛋白重组真核表达质粒 pcDNA3.1-BVDV-Erns,转染悬浮培养的CHO 细胞,进行上清分泌表达.SDS-PAGE 分析 Erns蛋白的表达和纯化,并用抗 His单克隆抗体和BVDV阳性血清进行Western blotting鉴定纯化蛋白;进一步使用纯化的Erns蛋白免疫新西兰大白兔,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)实验检测血清抗体水平及其免疫反应活性,用病毒中和实验测定免疫兔血清的中和抗体滴度.BCA蛋白定量试剂盒检测纯化的Erns蛋白浓度为 0.886 mg/mL,Western blotting结果显示,抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清均能够与纯化的Erns蛋白发生特异性免疫反应.间接ELISA和IFA实验结果显示,一免后第 7 天血清抗体呈阳性,并持续至免疫后第 28 天,血清抗体效价水平可达 1:128 000,且该血清抗体可以与MDBK细胞中感染的BVDV病毒发生特异性免疫反应.重组Erns蛋白免疫兔可诱导动物机体产生病毒中和抗体,中和效价为log10=2.71.本研究利用CHO细胞表达系统成功制备了纯化的BVDV Erns蛋白,并通过体内和体外实验证明,该重组蛋白具有良好的免疫原性,为牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)诊断方法及新型亚单位疫苗的研制奠定了基础.