换一批
换一批基于可见光测定的山羊支原体山羊肺炎亚种抗原定量
Quantification of antigen of Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae by optical assay
摘要：
山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)是山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)的病原,可用灭活疫苗和荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)间接血凝试剂进行预防和血清学检测,但高昂的培养成本和复杂的抗原定量一直困扰着生产人员.为解决生产实际中出现的这些问题,本研究基于 Mccp 代谢组学的前期理论基础,通过改变初始pH值的方法,初步筛选出初始pH值为 7.8 的可以同时提高 2 种抗原产量的糖发酵培养基.利用紫外可吸收光谱可识别酚红,以及十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)可与阴离子荚膜多糖结合的理论依据,建立了利用紫外光谱分析 Mccp 达到的培养阶段,以及利用 CTAB 沉淀法相对定量发酵液荚膜多糖抗原产量的方法.通过紫外图谱观察的方法可对应 Mccp 生长曲线进行指导生产,大大节省传统颜色变化单位(color change unit,CCU)法的监测时间,提高了原肉眼观察方法的精确度.建立的CTAB沉淀法可在 5 h内完成对CPS含量的监测,与传统的差值法相比大大缩短了时间,并且其准确度得到苯酚-硫酸法的验证.本研究优化的一种培养基和建立的两种相关性比较方法,可有效降低 Mccp 生产成本,提高生产效率,这些方法已在本实验室的研究阶段得到应用,为进一步改进 CCPP 灭活疫苗和荚膜多糖的生产工艺以及快速定量提供了实验数据.
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作者：
作者单位：
中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学 动物医学与生物安全学院 动物疫病防控全国重点实验室,甘肃 兰州 730000
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期刊：
《生物工程学报》2023年39卷12期 4874-4886页
MEDLINEISTICPKUCSCD
关键词：
山羊支原体山羊肺炎亚种改良培养基荚膜多糖紫外图谱CTAB沉淀法Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniaemodified culture-mediumcapsular polysaccharideultraviolet spectrumCTAB precipitation method
栏目名称：
动物及兽医生物技术
DOI：
10.13345/j.cjb.230178
发布时间：
2024-03-19
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