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随着基因编辑技术迅速发展,研究精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对精子发生及其调控机制研究、转基因动物研发、基因治疗和不孕不育症的治疗以及珍稀物种的保护均具有重要意义.溶酶体相关细胞器生物合成复合体1亚基1(biogenesis of lysosome-related organelles complex 1 subunit 1,BLOC1S1)具有抗布鲁氏菌的潜能,研究BLOC1S1对山羊SSCs的影响不仅能探究BLOC1S1促进 SSCs 增殖的能力,还能为其抗病育种研究提供细胞学基础.本研究通过同源重组构建BLOC1S1 过表达载体,通过慢病毒包装、转染与嘌呤霉素筛选成功构建了山羊精原干细胞BLOC1S1过表达细胞株.通过实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测BLOC1S1的过表达效率为 18 倍,同时细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期、5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)染色等实验结果表明,BLOC1S1能显著增加山羊SSCs的增殖活性.RT-qPCR、免疫荧光染色、Western blotting结果显示与增殖相关的基因(PCNA、CDK2、CCND1)上调,同时调控精原干细胞增殖的关键基因EIF2S3Y的表达量也上调.本研究成功构建了山羊精原干细胞BLOC1S1 过表达细胞株,提高其增殖能力,并且这种促增殖能力可能是通过EIF2S3Y/ERK通路实现的.本研究为探究 BLOC1S1 对山羊精原干细胞的调控作用奠定了细胞学基础,并为进一步研究BLOC1S1的生物学功能提供细胞平台,为繁育BLOC1S1修饰抗病山羊奠定了基础.