转基因本氏烟草中CtDXR基因拷贝数及耐盐耐高温功能的初步分析
Preliminary analysis of CtDXR gene copy number,salt tolerance and heat tolerance in Transgenic Nicotiana benthamiana
评估转基因本氏烟草中 CtDXR基因的拷贝数,并初步分析其耐盐与耐高温能力.首先利用Southern Blot技术确定野生型本氏烟草中Actin基因的拷贝数,并以Actin基因为内参基因,以转 CtDXR基因本氏烟草为材料,采用实时荧光定量PCR方法,检测转基因植株中 CtDXR基因的拷贝数.最后,初步分析转基因植株的耐盐与耐高温能力.基于PCR方法,随机检测 10 株T1 代转基因本氏烟草植株均能扩增出目的条带,表明它们均已成功转入目的基因 CtDXR;Actin基因在本氏烟草基因组中为单拷贝基因;以Actin基因为内参基因,最终确定 80%的转 CtDXR基因植株为单拷贝或低拷贝株系;盐胁迫下,转 CtDXR基因植株的株高(P<0.01)、侧根数(P<0.01)与鲜重(P<0.001)优于野生型植株,高温胁迫下,转 CtDXR基因植株的株高(P<0.01)、叶片数(P<0.01)与鲜重优于野生型植株,表明转基因植株具有更强的耐盐和耐高温能力.利用研究建立的转基因本氏烟草外源基因拷贝数的检测方法,对转 CtDXR基因植株完成外源基因拷贝数的鉴定,且初步鉴定了 CtDXR基因具有耐盐与耐高温功能.
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