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微小RNA-22-3p抑制人肾小管上皮细胞NLRP3活化

MicroRNA-22-3p Inhibits NLRP3 Activation in Human Renal Tubular Epithelial Cells

摘要:

目的:探讨微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对人肾小管上皮细胞NLRP3活化的影响.方法:将包含NLRP3基因3'-非编码区(3'-UTR)序列的野生型及突变型双荧光素酶报告基因质粒(psiCHECK2)分别与miR-22-3p mimic(模拟物)、miR-22-3p inhibitor(抑制物)共转染人肾小管上皮细胞株(HK-2),检测细胞荧光素酶活性;HK-2 细胞随机分组如下:(1)正常对照组;(2)miR-22-3p mimic+LPS+ATP 组;(3)miR-22-3p control+LPS+ATP 组;(4)miR-22-3p inhibitor+LPS+ATP 组;(5)miR-22-3p mimic+LPS 组;(6)miR-22-3p control+LPS 组;(7)miR-22-3p inhibitor+LPS组,采用定量PCR(RT-PCR)、免疫印迹(WB)分别检测NLRP3 mRNA和蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测白介素-1β(IL-1β)水平及半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)活性.结果:NLRP3-3'UTR野生型分别与miR-22-3p mimic、miR-22-3p inhibitor共转染HK-2细胞后,与对照组比较,荧光素酶活性分别出现降低与升高(P<0.05).此外,与miR-22-3p control+LPS组比较,miR-22-3p mimic+LPS组NLRP3 mRNA 和蛋白表达、1L-1β 水平及 Caspase-1 活性均下降(P<0.05),miR-22-3p inhibitor+LPS 组 NLRP3 mRNA 和蛋白表达、IL-1β 水平及 Caspase-1 活性均升高(P<0.05);与 miR-22-3p control+LPS+ATP 组比较,miR-22-3p mimic+LPS+ATP 组 NLRP3 mRNA 和蛋白表达、IL-1β 水平及 Caspase-1 活性均下降(P<0.05),miR-22-3p inhibitor+LPS+ATP 组 NLRP3 mRNA 和蛋白表达、IL-1β 水平及 Caspase-1 活性均升高(P<0.05).结论:miR-22-3p可抑制人肾小管上皮细胞NLRP3活化.

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作者: 林莉 [1] 李菊霜 [1] 朱戈丽 [1] 张艳霞 [1] 伍军 [1]
期刊: 《微循环学杂志》2024年34卷3期 1-5,11页 ISTIC
分类号: R692.6
栏目名称: 基础与实验
DOI: 10.3969/j.issn.1005-1740.2024.03.001
发布时间: 2024-09-02
基金项目:
湖北省自然科学基金 武汉市卫生和计划生育委员会科研项目
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