核桃抗氧化肽的酶法制备、鉴定及其对脂氧合酶的抑制机理
Enzymatic Preparation and Identification of Walnut Antioxidant Peptides and Their Inhibitory Mechanism on Lipoxygenase
作者以核桃粕为原料制备抗氧化肽,用胰酶酶解核桃蛋白质,以超氧阴离子自由基清除率为主要指标优化酶解条件,分离纯化酶解产物.通过LC-MS/MS技术鉴定多肽序列,通过最低对接结合能、蛋白质稳定指数等参数筛选抗氧化肽.结果表明,最优酶解条件下,酶解液的超氧阴离子自由基清除率为26.57%.酶解液经Smartdex G-50分离纯化得到4个组分,在相同质量浓度下,D-4组分超氧阴离子自由基清除率最高.对D-4组分进行序列鉴定,经计算机虚拟筛选推测R.AGIQFPVG.R为D-4组分抗氧化活性的主要贡献物.该肽段和脂氧合酶最低对接结合能为-21 933.85 J/mol,蛋白质预测结果为稳定蛋白质.对接结果表明,R.AGIQFPVG.R和脂氧合酶非活性位点Glu186结合,说明该肽段主要起非竞争性抑制作用,该研究为天然抗氧化剂的筛选提供参考.
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