丁酸钠可通过诱导铁自噬发挥抗结直肠癌作用
SODIUM BUTYRATE EXERTS AN ANTI-COLORECTAL CANCER ACTION BY INDUCING FERRITINOPHAGE IN HCT-116 CELLS
目的 探讨丁酸钠(sodium butyrate,NaB)是否可通过诱导铁自噬发挥其抗结直肠癌作用.方法 以MTT、平板克隆和PI染色观察NaB对结直肠癌HCT-116 细胞增殖和死亡的影响;自噬检测试剂盒(MDC法)、亚铁离子荧光探针FerroOrange、Western blot检测p62、LC3、FTH1、NCOA4 表达探究NaB是否诱导结直肠癌HCT-116 细胞发生铁自噬.结果 MTT和平板克隆实验结果显示,2 mmol/L NaB即可显著抑制HCT-116 细胞活力(P<0.001)和克隆球形成(P<0.01);PI染色结果显示,NaB可使死亡细胞数量增加;铁离子螯合剂去铁胺(DFO)可逆转NaB对HCT-116细胞增殖活性的抑制和促死亡作用(P<0.05);自噬抑制剂氯喹(CQ)可进一步增强NaB对HCT-116 细胞增殖活性的抑制作用(P<0.001);MDC法和FerroOrange检测结果显示,NaB可增加HCT-116 细胞自噬体形成和细胞内Fe2+水平(P<0.001),DFO和CQ均可逆转NaB对HCT-116 细胞内Fe2+水平的上调作用(P<0.05);Western blot结果显示,NaB可下调HCT-116 细胞p62、FTH1 蛋白表达水平(P<0.001),上调LC3-II、NCOA4 蛋白表达水平(P<0.001,P<0.05),CQ可逆转NaB对HCT-116 细胞FTH1 蛋白表达水平的下调作用(P<0.05).结论 NaB可通过诱导铁自噬发挥抗结直肠癌作用.
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