活性氧簇/沉默信息调节因子1在高氧致支气管上皮细胞损伤中的作用
Role of reactive oxygen species/silent information regulator 1 in hyperoxia-induced bronchial epithelial cell injury
目的 探讨活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高氧致BEAS-2B细胞线粒体损伤的影响.方法 实验分为三部分:(1)细胞分为高氧0 h(H0)组、H6组、H12组、H24组、H48组.(2)细胞分为对照组、H48组、高氧48 h+SIRT1抑制剂(H48+EX 527)组和高氧48 h+SIRT1激动剂(H48+SRT1720)组.(3)细胞分为对照组、高氧48 h+乙酰半胱氨酸(H48+NAC)组和H48组.采用活性氧试剂盒检测ROS水平,Western blot法检测SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平,免疫荧光染色法检测线粒体相关蛋白表达,透射电镜检测线粒体形态.结果(1)与H0组相比,H6组、H12组、H24组和H48组ROS荧光强度增加(P<0.05),H48组SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平降低(P<0.05),H24组和H48组线粒体相关蛋白荧光强度降低(P<0.05).(2)与H48组相比,H48+SRT1720组线粒体相关蛋白表达水平升高,线粒体平均长宽比增加(P<0.05);H48+EX 527组线粒体平均面积减少(P<0.05).(3)与H48组相比,H48+NAC组ROS荧光强度降低,SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平升高,线粒体平均面积和平均长宽比增加(P<0.05).结论 ROS/SIRT1轴参与了高氧诱导的BEAS-2B细胞线粒体损伤.
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