正交设计探讨续苓健骨方对快速骨丢失模型大鼠的组方优化研究
An orthogonal design study on the optimization of the Xuling Jiangu Formula for inducing rapid bone loss in rat models
目的 通过正交设计观察续苓健骨方中的药物对卵巢切除术(ovariectomy,OVX)模型大鼠骨密度、骨微结构和骨代谢影响的主次作用,并探讨疗效较佳优化组别的潜在作用机制.方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组、优化 1组、优化 2 组、优化 3 组、优化 4 组、优化 5 组、优化 6 组、优化 7 组和优化 8 组,每组 10 只,采用OVX制备大鼠快速骨丢失模型,连续灌胃 12 周后取材备检.双能X线骨密度仪检测胫骨近端骨密度,micro-CT检测胫骨微观结构,ELISA检测血清骨吸收金指标CTX和骨形成金指标PINP的含量,Real-time PCR和Western blot检测股骨OPG、RANKL mRNA和蛋白的表达水平.结果 续苓健骨方组、优化 4 组、6 组和 7 组骨密度均显著升高(P<0.05),优化 4 和 7 组 Tb.N 和 BV/TV 显著升高(P<0.001),续苓健骨方组和优化1~8 组血清CTX、PINP均不同程度降低,续苓健骨方组和优化7 组OPG mRNA和蛋白表达水平显著升高、RANKL mRNA和蛋白表达水平显著降低.结论 优化 4 组、6 组和 7 组是治疗效果较好的组别,可通过调控OPG/RANKL发挥抗骨质疏松作用,续断、骨碎补、女贞子、红花和川芎是续苓健骨方取效的主要有效药物.
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