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IGFBP-3抗原的真核表达分析及校准品制备评估

Eukaryotic expression analysis and calibration materials evaluation of IGFBP-3 antigen

摘要:

目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析.方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分别转化毕赤酵母GS115、HEK293细胞及CHO细胞进行表达.以Ni-NTA和SDS-PAGE技术对表达产物进行活性分析及纯化鉴定,利用IGFBP-3检测试剂盒对纯化抗原进行校准品性能分析.结果:IGFBP-3抗原表达过程中易降解,仅在HEK293细胞中成功得到全长蛋白,且配制成的校准品考核反应性及稳定性均满足需求,为诊断试剂盒的进一步开发奠定了坚实基础.结论:HEK293体系表达的IGFBP-3抗原更适用于试剂盒校准品.

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作者: 王岚 [1] 贾国超 [1]
作者单位: 郑州工程技术学院食品与化工学院,郑州 450044 [1]
期刊: 《中国免疫学杂志》2024年40卷7期 1501-1506页 ISTICPKUCSCD
分类号: R363
栏目名称: 论著/免疫学技术与方法
DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2024.07.026
发布时间: 2024-08-05
基金项目:
河南省青年骨干教师项目
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