IGFBP-3抗原的真核表达分析及校准品制备评估
Eukaryotic expression analysis and calibration materials evaluation of IGFBP-3 antigen
目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析.方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分别转化毕赤酵母GS115、HEK293细胞及CHO细胞进行表达.以Ni-NTA和SDS-PAGE技术对表达产物进行活性分析及纯化鉴定,利用IGFBP-3检测试剂盒对纯化抗原进行校准品性能分析.结果:IGFBP-3抗原表达过程中易降解,仅在HEK293细胞中成功得到全长蛋白,且配制成的校准品考核反应性及稳定性均满足需求,为诊断试剂盒的进一步开发奠定了坚实基础.结论:HEK293体系表达的IGFBP-3抗原更适用于试剂盒校准品.
更多- 浏览:4
- 被引:0
- 下载:3
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文