Takeda G蛋白偶联受体5在血管平滑肌细胞增殖和迁移中的作用
Role of TGR5 in proliferation and migration of vascular smooth muscle cells
目的 探讨Takeda G蛋白偶联受体5(Takeda G pro-tein-coupled receptor 5,TGR5)在小鼠血管平滑肌细胞(vas-cular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和迁移中的作用及机制.方法 用血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF-BB)诱导VSMCs增殖、迁移,以INT-777特异性激活TGR5,CCK-8试剂盒及增殖细胞核抗原(Ki-67)免疫荧光染色用于检测细胞增殖能力,划痕试验用于检测细胞迁移能力.Western blot检测TGR5蛋白水平变化.为探究TGR5在血管内膜增生中的作用,将40只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、内膜损伤组、假手术+UDCA(熊去氧胆酸,TGR5激动剂)组及内膜损伤+UDCA组,每组10只.造模完成后按组分别予以口服普通维持饲料及含0.5%UD-CA的普通维持饲料,持续21 d后分别取材,HE染色观察颈动脉内膜增生程度,Ki-67免疫荧光染色观察颈动脉内膜血管平滑肌增殖变化.结果 特异性激活TGR5明显降低VSMCs增殖活力及Ki-67阳性细胞率,同时使VSMCs划痕愈合速度减慢.特异性激活TGR5使细胞内UCP2表达增加、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平降低.过氧化氢恢复细胞内ROS水平后,TGR5抑制VSMCs增殖迁移的作用被削弱.激活TGR5能减轻颈动脉损伤后内膜增生.结论 TGR5可能通过UCP2改善细胞内氧化应激,从而抑制小鼠VSMCs的增殖和迁移.
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