换一批
换一批Yes相关蛋白在电离辐射后表皮干细胞分化中的作用
Roles of Yes-associated protein in epidermal stem cell differentiation after ionizing radiation
摘要：
目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)在电离辐射(IR)后表皮干细胞(EPSC)分化中的作用.方法 ①利用打孔器建立小鼠背部皮肤损伤,随后分为IR组(给予60Co γ射线局部照射),对照组(不照射);照射后0,1,3,6,9和12d收集创面皮肤组织提取RNA和蛋白,Western印迹法检测创面愈合过程中YAP蛋白变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测创面愈合过程中Yap及其下游靶基因结缔组织生长因子(Ctgf)和富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)的mRNA变化.②将EPSC给予60Co γ射线照射,细胞对照组不照射;4或8Gy剂量照射后4,12,24和36h收集细胞提取RNA,RT-qPCR检测YAP mRNA变化.4或8Gy剂量照射36h收集细胞提取蛋白,Western印迹法检测YAP蛋白水平;③ 短发夹RNA(shRNA)构建稳定的YAP基因敲低细胞,Western印迹法验证sh YAP的敲低效率;RT-qPCR检测IR后YAP敲低对K1和K10 mRNA的影响.结果 ①与对照组相比,IR组小鼠在创面愈合过程中YAP蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01),Yap及其下游靶基因Ctgf和Cyr61的mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01).②与细胞对照组相比,IR组细胞YAP mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01).③在sh YAP稳转细胞中,YAP蛋白水平显著降低(P<0.01);sh YAP在IR后EPSC分化标志物K1和K10的mRNA水平明显降低(P<0.01).结论 YAP调控IR后创面愈合过程中EPSC的分化.
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作者：
作者单位：
南华大学衡阳医学院,军事医学研究院研究生协作培养基地,湖南 衡阳 421001;军事医学研究院,北京 100850
[1]
黄山市黄山区人民医院,安徽 黄山 245700
[2]
中国人民解放军总医院第五医学中心,北京 100039
[3]
军事医学研究院,北京 100850;青岛大学基础医学院,山东 青岛 266071
[4]
兰陵县结核病防治所,山东 临沂 277700
[5]
军事医学研究院,北京 100850
[6]
期刊：
《中国药理学与毒理学杂志》2024年38卷7期 511-516页
ISTICPKU
关键词：
Yes相关蛋白电离辐射表皮干细胞细胞分化Yes-associated proteinionizing radiationepidermal stem cellcell differentiation
分类号：
R966
栏目名称：
论著
DOI：
10.3867/j.issn.1000-3002.2024.07.004
发布时间：
2024-08-14
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