人干扰素α1b体外抗呼吸道病毒的药效学研究
Human Interferon α1b Broad-spectrum Viruses Pharmacodynamics Study in Vitro
目的:评价人干扰素(interferon,IFN)α1b体外广谱抗呼吸道病毒的药效.方法:采用CPE(细胞病变)法检测IFNα1b和阳性对照药对MDCK、U937、LLC-MK2、Hep-2、Vero E6、BHK-21、RD、A549细胞的毒性;采用神经氨酸酶活性检测法检测IFNα1b 对流感病毒株 CIV-H1N1/CNIC-1909(H1N1)、A/kansas/14/2017(NYMCX-327)(H3N2)和 B/Maryland/15/2016(NYM-CBX-69A)的抑制效果;采用ELISA试剂盒检测法检测IFNα1b对A型流感病毒株(H1N1,A/PuertoRico/8/1934)及引起的炎症因子的抑制效果;采用间接免疫荧光检测法(IFA)检测IFNα1b对呼吸道合胞病毒(RSV A2)的抑制效果以及对人副流感病毒(HPIV3)的抑制效果;采用CPE法检测IFNα1b对登革2型(DENV-2)病毒的抑制效果、检测IFNα1b对EV71病毒的抑制效果、检测IFNα1b对人类腺病毒3型病毒株(AdV3)和人类腺病毒5型病毒株(AdV5)的抑制效果.采用空斑法检测IFNα1b对人类1型单纯疱疹病毒(HSV-1)的抑制效果.结果:IFNα1b对MDCK细胞的CC50值为479 572 U·mL-1,抑制H1N1的EC50为4 265 U·mL-1,选择指数(SI)为 112.44,抑制 H3N2 的 EC50为 101 950 U·mL-1,SI为4.70,抑制 B 型流感病毒的 EC50为18 240 U·mL-1,SI 为 18.50;IFNα1b 对 U937 细胞的 CC50值为大于 100 000 U·mL-1,抑制 H1N1 病毒的 EC50为 37 897 U·mL-1,SI 为大于2.64,抑制炎症因子IP-10的EC50为大于100 000 U·mL-1,抑制炎症因子IL-8的EC50为大于100 000 U·mL-1;IFNα1b和对LLC-MK2细胞的CC50值为大于10 000 U·mL-1,抑制HPIV3病毒的EC50为3.92 U·mL-1;IFNα1b对Hep 2细胞的CC50值为大于100 000 U·mL-1,抑制RSV病毒的EC50为 1 661 U·mL-1,SI为大于60.2;IFNα1b对Vero E6细胞的CC50值为大于500 U·mL-1;IFNα1b 对 BHK-21 细胞的 CC50值为大于 100 U·mL-1,抑制 DENV-2 病毒的 EC50为 0.90 U·mL-1,SI 为大于111.11;IFNα1b 对 RD 细胞的 CC50值为大于 100 000 U·mL-1,抑制 EV71 病毒的 EC50为大于 100 000 U·mL-1;IFNα1b 对 A549细胞的 CC50值为大于 100 000 U·mL-1,抑制 AdV3 病毒的 EC50为 100 000 U·mL-1,抑制 AdV5 病毒的 EC50为 100 000 U·mL-1;IFNα1b 对 Vero 细胞的 CC50值为大于 100 000 U·mL-1,抑制 HSV-1 病毒的 EC50为 6 898 U·mL-1,SI 为大于 14.5.结论:在体外细胞水平上,IFNα1b对A型流感病毒H1N1和H3N2、B型流感病毒、RSV病毒、DENV-2病毒、HPIV3病毒、HSV-1病毒均具有抑制作用,对EV71病毒、AdV3病毒和AdV5病毒无抑制作用,IFNα1b有望成为预防和治疗上呼吸道病毒感染的临床药物.
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