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换一批C5补体抑制剂OmCI的重组表达、纯化和活性研究
Recombinant Expression,Purification and Activity of Complement C5 Inhibitor OmCI
摘要：
OmCI(Ornithodoros moubata complement inhibitor,1)是靶向补体C5的药物,用于治疗补体介导的疾病.该研究建立了 1的重组、表达、分离、纯化方法,并对其进行活性验证.采用重组大肠埃希菌高密度发酵技术,以胞外可溶形式表达1,融合蛋白的发酵表达产量为317 mg/L.发酵上清经调酸预处理、酶切去除标签蛋白,阴离子交换色谱、反相色谱纯化后得到纯度为98.2％的目的蛋白,总收率为62.8％.目的蛋白经质谱验证,相对分子质量正确;采用体外补体经典途径的抑制试验测得IC50值为8.59 nmol/L,与补体C5的结合常数(KD)为4.74 nmol/L,证明其在大肠埃希菌中成功表达,且具有C5抑制活性.该研究为C5补体抑制剂类药物的高效制备提供了参考.
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作者：
作者单位：
浙江工业大学长三角绿色制药协同创新中心,浙江杭州 310014;中国医药工业研究总院,上海 201203
[1]
中国医药工业研究总院,上海 201203;复旦大学药学院,上海 201203
[2]
中国医药工业研究总院,上海 201203;上海多米瑞生物技术有限公司,上海 201203
[3]
上海多米瑞生物技术有限公司,上海 201203
[4]
期刊：
《中国医药工业杂志》2024年55卷7期 940-947页
ISTICPKUCSCD
关键词：
C5补体抑制剂(OmCI)重组表达发酵纯化活性试验Ornithodoros moubata complement inhibitor(OmCI)recombinant expressionfermentationpurificationactivity test
栏目名称：
研究论文
DOI：
10.16522/j.cnki.cjph.2024.07.007
发布时间：
2024-08-22
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