基于JAK2/STAT3信号通路探讨黄芪-山茱萸对高糖诱导足细胞损伤的保护作用
Experimental Study on Protective Effects of Huangqi-Sanzhuyu(Astragalus Membranaceus-Cornus Officinalis)on High Glucose-Induced Podocyte Injury by Inhibiting JAK2/STAT3 Signal Pathway
目的:探究黄芪-山茱萸对高糖诱导肾足细胞损伤的保护作用及机制.方法:CCK8法检测黄芪-山茱萸(0、175、350、700、1400、2800 mg/L)对足细胞(MPC-5)活性的影响.30 mmol/L葡萄糖诱导MPC-5细胞损伤,350、700、1400 mg/L黄芪-山茱萸进行干预;ELISA测定MPC-5细胞IL-6、IL-1β水平,流式细胞术测定细胞凋亡,免疫荧光染色测定MPC-5肾病蛋白(nephrin)、足细胞素(podocin)表达,qRT-PCR 测定 MPC-5 细胞 nephrin、podocin、结蛋白(desmin)、Wilm 瘤基因 1(WT-1)基因表达,Western blot测定细胞Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路磷酸化表达.结果:2800 mg/L黄芪-山茱萸可显著抑制MPC-5细胞活性(P<0.01).MPC-5细胞经高糖诱导后,IL-6、IL-1β 水平升高,凋亡增加,nephrin、podocin、WT-1表达降低,desmin表达升高,JAK2/STAT3信号通路磷酸化表达增加(P<0.01).350、700、1400 mg/L黄芪-山茱萸可抑制高糖诱导MPC-5细胞IL-6、IL-1β水平升高和凋亡,增强nephrin、podocin、WT-1表达,降低desmin表达,抑制JAK2/STAT3信号通路磷酸化表达(P<0.05).结论:黄芪-山茱萸可减轻高糖诱导足细胞炎症和凋亡损伤,其机制与抑制JAK2/STAT3通路磷酸化有关.
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