换一批
换一批黄草乌法呢基焦磷酸合酶基因(AvFPS)的克隆及功能验证
Cloning and functional verification of farnesyl pyrophosphate synthase gene(AvFPS)from Aconitum vilmorinianum
摘要：
黄草乌为云南的道地药材,其富含滇乌碱等二萜生物碱,二萜生物碱是其主要活性成分.法呢基焦磷酸合酶(FPS)是萜类生物合成途径中的一个关键酶,在二萜生物碱生物合成中发挥重要作用,其功能研究有助于揭示二萜生物碱合成的分子机制.该研究基于黄草乌转录组数据,筛选到 1 条FPS基因(AvFPS),克隆其全长序列并进行了生物信息学分析、功能验证以及基因表达分析.AvFPS开放阅读框(ORF)为 1 056 bp,编码 351 个氨基酸,相对分子质量约为 41 kDa,其具有异戊烯基转移酶的 2 个典型保守功能域"DDIMD"和"DDYXD".在大肠杆菌中表达AvFPS重组蛋白,用纯化重组蛋白进行体外酶促反应,结果表明,AvFPS能够催化法呢基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate,FPP)的合成.qRT-PCR分析结果表明,AvFPS基因在黄草乌根、茎、叶和花中均有表达,在根中表达量最高;经MeJA诱导后,AvFPS的表达量明显上调.该研究明确了AvFPS的催化功能,揭示了AvFPS在不同组织以及经MeJA诱导不同时间段的表达模式,为更深入了解FPS基因在二萜类成分生物合成途径中的功能提供了参考.
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作者：
期刊：
《中国中药杂志》2024年49卷16期 4387-4395页
MEDLINEISTICPKUCSCD
关键词：
黄草乌法呢基焦磷酸合酶功能验证表达分析Aconitum vilmorinianumfarnesyl pyrophosphate synthasefunctional verificationexpression analysis
栏目名称：
分子生药学
DOI：
10.19540/j.cnki.cjcmm.20240517.103
发布时间：
2024-09-04
基金项目：
云南省应用基础中医联合专项项目
云南省王源超专家工作站项目
中央本级重大增减支项目
云南省高层次人才培养支持计划青年拔尖人才项目
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