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乙型肝炎病毒E抗原肝细胞作用蛋白AK026018表达谱芯片的研究

Screening and identification of genes trans-regulated by a novel HBeAg interacting protein AK026018 with microarray assay

摘要:

目的应用基因芯片技术,筛选能被乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)肝细胞作用蛋白AK026018反式调节的靶基因,初步研究该蛋白的生物学功能.方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HepG2细胞中扩增编码AK026018蛋白的全基因,构建真核表达载体,转染肝母细胞瘤系HepG2,提取总mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1的HepG2细胞进行DNA芯片分析并比较.结果经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确.在8464个基因表达谱的筛选中,发现有122个基因有差异表达,其中78种基因表达水平显著下调,45种基因表达水平显著上调.结论成功地应用DNA芯片技术筛选出HBeAg结合蛋白新基因AK026018的反式调节蛋白,证明该基因对于肝细胞基因表达谱有显著影响.

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作者: 李伯安 [1] 侯俊 [1] 何卫平 [1] 戚扬 [1] 迟舒萍 [1] 赵军 [1] 程云 [1]
分类号: R3
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2006.02.014
发布时间: 2006-07-07
基金项目:
国家高技术研究发展计划(863计划)
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