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CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞通过NKG2D增强急性髓性白血病中NK细胞毒性

CD4+CD25+foxp3+ regulatory T cells promote NK cytotoxicity in acute myeloid leukemia via NKG2D

摘要:

目的:CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞在急性髓性白血病中调控NKG2D介导NK细胞毒性的研究。方法:免疫磁珠法分离急性髓性白血病(AML)和健康对照外周血NK细胞和CD4+CD25+细胞,分析foxp3与NKG2D表达,CD4+CD25+foxp3+细胞的比例与NK细胞的细胞毒作用相关性。Spearman法分析CD4+CD25+foxp3+细胞比例与NK细胞的细胞毒性和NGK2D相关性。foxp3过表达处理AML外周血淋巴细胞后,流式细胞术检测NKG2D,IFN-γ和CD107a表达,LDH法检测NK细胞毒性。GEPIA2数据库分析AML患者NKG2D和foxp3基因表达相关性,TCGA数据库分析AML转录组数据中与NKG2D表达高相关性基因。IL-2 (10 μg/mL) ,IL-15 (10 μg/mL)处理NK细胞24 h后,流式细胞术检测NKG2D和CD107a表达,酶联免疫反应法检测NK细胞分泌的IFN-γ,LDH法检测NK细胞毒性。采用t检验等方法统计分析组间差异及变量相关性。结果:与对照比较,AML组NK细胞中NKG2D表达(平均荧光强度MFI:942.25 ± 117.17比3245.28 ± 367.43)降低(P < 0.001)。foxp3表达与NKG2D呈正相关性(r = 0.590,P < 0.001),NKG2D表达百分数与外周血淋巴细胞中CD4+CD25+foxp3+细胞的比例呈正相关(r = 0.708,P = 0.002),AML患者外周血NK细胞活力也与CD4+CD25+foxp3+细胞的比例呈正相关(r = 0.655,P = 0.006)。与OE-NC比较,OE-foxp3组细胞中NKG2D的表达水平(MFI:2115.37 ± 269.53比914.28 ± 103.36)、杀伤能力(58.24 % ± 3.17%比24.18 % ± 2.35%)、NK细胞毒性评估指标CD107a (45.43% ± 1.28%比18.24% ± 1.49%)和IFN-γ水平(24.16 % ± 1.17%比16.28 % ± 0.95%)升高(P均< 0.001)。TCGA数据分析发现,NKG2D表达与CD3G、IL-3、IL-2、CD3E、IL-10、IL-17、IL-7R、IL-15、EZH2等基因相关性较高,流式细胞术检测发现,与对照比较,IL-2和IL-15处理后NK细胞的表面受体NKG2D和CD107a表达、IFN-γ水平、NK细胞毒性均升高。结论:AML外周血中,NK细胞表面受体NKG2D低于正常对照,其中CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞通过IL-2和IL-15影响NKG2D表达进而调控NK细胞毒性。

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作者: 薛春娥 [1] 赵娟娟 [1] 刘韦成 [1] 张义亮 [1] 马毓晗 [1] 李迎巧 [1]
栏目名称: 论著
DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2024.04.003
发布时间: 2024-08-20
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