换一批
换一批基于MLPA结合熔解曲线法鉴别山药及其常见混伪品
Identification of Dioscoreae Rhizoma and Common Adulterants Based on MLPA Combined with Melting Curve Method
摘要：
目的:利用MLPA技术结合熔解曲线法建立一种能鉴别山药及其常见混伪品的新方法.方法:以山药、参薯、木薯、番薯为研究对象,针对四个物种的matK序列分别设计MLPA特异性探针,通过DNA变性、杂交、连接、扩增及熔解反应等步骤,建立MLPA-熔解曲线鉴别体系,利用各样品熔解曲线中特异性峰(Tm值)的差异实现不同物种的鉴定.结果:27份样品中,山药Tm值为78.3 ℃,参薯Tm值为79.9℃,木薯Tm值为81.2℃,番薯Tm值为82.9℃,且相互之间没有交叉干扰.该法对山药、参薯、木薯、番薯各自单独的最低检测限为0.1 ng/μL;对相互混淆掺伪的最低有效检出率为5％.27份样品的检测结果均与测序结果一致.结论:MLPA技术结合熔解曲线法具有特异性强、灵敏度高、操作简单等优点,具有进一步推广应用的潜力.
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作者：
作者单位：
湖北省药品监督检验研究院,湖北 武汉 430075;湖北中医药大学,湖北 武汉 430065
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湖北省药品监督检验研究院,湖北 武汉 430075;湖北大学,湖北 武汉 430062
[2]
湖北中医药大学,湖北 武汉 430065
[3]
湖北省药品监督检验研究院,湖北 武汉 430075;国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室,湖北 武汉 430075
[4]
期刊：
《中药材》2024年47卷2期 324-329页
MEDLINEISTICPKU
关键词：
山药多重连接探针扩增技术熔解曲线matK鉴别Dioscoreae RhizomaMultiplex ligation-dependent probe amplification(MLPA)Melting curvematKIdentify
分类号：
R282.71
栏目名称：
资源与鉴别
DOI：
10.13863/j.issn1001-4454.2024.02.010
发布时间：
2024-09-10
基金项目：
湖北省青年拔尖人才培养计划项目
湖北中药质控标准物质研制及技术平台建立
中国食品药品检定研究院项目
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