半枝莲多糖通过Hippo通路介导人卵巢癌OVCAR3细胞铁死亡的作用机制
目的:研究半枝莲多糖对人卵巢癌 OVCAR3 细胞铁死亡的调控作用及其作用机制.方法:采用噻唑蓝法检测不同质量分数(0、10、20、40、80 mg/L)半枝莲多糖作用 24、48 和 72 h对OVCAR3 细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术和蛋白质印迹法检测其对细胞凋亡的影响,实时荧光定量法检测 E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,最后评估 10 μmol/L 维替泊芬[Yes 相关蛋白(yes associated protein,YAP)抑制剂]和 80 mg/L半枝莲多糖两者单用或联用对铁死亡相关分子长链脂酰辅酶A合成酶 4(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)、Hippo 通路中磷酸化 YAP(phosphorylation YAP,p-YAP)和 YAP 蛋白表达的影响.结果:半枝莲多糖可提高 OVCAR3 细胞增殖抑制率和凋亡率(P<0.05);可上调 Bax、下调 Bcl-2 的蛋白表达水平(P<0.05);可上调 OVCAR3 细胞中 E-cadherin mRNA 的表达,下调 N-cad-herin和 Vimentin mRNA的表达(P<0.05);可抑制 ACSL4 和 TFRC mRNA的表达(P<0.05),降低 p-YAP/YAP 比值(P<0.05).结论:半枝莲多糖可抑制 OVCAR3 细胞的增殖和上皮细胞-间充质转化,促进细胞凋亡和铁死亡,这可能与半枝莲多糖对 Hippo通路的抑制有关.
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