纤维蛋白原诱导SH-SY5Y细胞凋亡和损伤的机制研究
A study on the mechanism of fibrinogen-induced apoptosis and mitochondrial damage in SH-SY5Y cells
目的 探讨纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)对人神经母细胞瘤细胞(Human neuroblastoma cells,SH-SY5Y)的影响及其机制.方法 采用不同水平的纤维蛋白原(0、2、4、8 mg/mL)处理SH-SY5Y细胞,并使用了多种实验方法来评估其对细胞的影响:CCK8试剂盒(Cell counting kit-8 viability assay)检测细胞活力;Hoechst33342/碘化丙啶(Propidine iodide,PI)染色试剂盒观察细胞凋亡情况;细胞色素c氧化酶Ⅳ(Cy-tochrome C oxidase Ⅳ,COX Ⅳ)细胞免疫荧光染色检测线粒体功能损伤;蛋白免疫印迹法检测线粒体凋亡通路相关指标[B 淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl2 关联 X 蛋白(Bcl2 associated X protein,Bax)、细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C)、活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Activated caspase-3)]的表达水平.结果 SH-SY5Y细胞暴露于纤维蛋白原会显著降低细胞活力,触发神经元凋亡,诱导线粒体功能障碍.此外,Western blot分析发现纤维蛋白原处理也改变了 SH-SY5Y细胞中线粒体通路凋亡相关指标(Bcl-2,Bax,Cytochrome C,Activated caspase-3)的表达水平.结论 纤维蛋白原引起了 SH-SY5Y细胞的损伤和凋亡,其作用机制可能涉及线粒体功能障碍.
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