目的:探讨β-分泌酶反义核糖核酸(BACE1-AS)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞损伤的影响及其机制。方法:Ang Ⅱ处理H9c2心肌细胞(购自中国科学院上海细胞库)建立心肌细胞损伤模型，H9c2心肌细胞培养液中加入Ang Ⅱ建立心肌细胞损伤模型(Ang Ⅱ组)，同时将正常培养的心肌细胞作为对照(Con组)。分别将干扰对照序列(si-NC)、干扰BACE1-AS序列(si-BACE1-AS)、抑制剂阴性对照序列(anti-miR-NC)、Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS与miR-137抑制剂(anti-miR-137)转染至心肌细胞，加入含有浓度为1 μmol/L Ang Ⅱ的培养液继续培养48 h，分别记作Ang Ⅱ＋si-NC、Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS、Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS＋anti-miR-NC、Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS＋anti-miR-137组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测BACE1-AS、微小RNA-137(miR-137)的表达水平；检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告实验检测BACE1-AS和miR-137的靶向关系；蛋白质印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达。两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK- q检验。 结果:与Ang Ⅱ＋si-NC组比较，Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS组凋亡率显著降低[(14.83±2.28)%比(27.84±1.54)%， t＝28.137， P<0.05]，bax蛋白水平显著降低(0.64±0.10比0.97±0.02， t＝40.627， P<0.05)，bcl-2蛋白水平显著升高(0.68±0.05比0.33±0.04， t＝19.032， P<0.05)，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验证实BACE1-AS可靶向结合miR-137。Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS＋anti-miR-137组miR-137、SOD和bcl-2水平低于Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS＋anti-miR-NC组(0.36±0.11比0.99±0.01、21.18±1.66比32.85±2.98、0.38±0.08比0.68±0.04， t＝17.111、10.263、10.062， P<0.05)，LDH、MDA、凋亡率和bax水平高于Ang Ⅱ＋si-BACE1-AS＋anti-miR-NC组(377.03±2.75比323.52±20.71、30.80±2.56比18.06±0.58、23.04±2.55比14.80±0.35、0.88±0.04比0.63±0.05， t＝7.684、14.561、9.604、11.713， P<0.05)，差异均有统计学意义。 结论:敲低BACE1-AS表达可通过上调miR-137的表达来减轻Ang Ⅱ诱导的心肌细胞损伤。

目的:探讨长链非编码核糖核酸长基因非编码核糖核酸-p53诱导转录本(lncRNA LINC-PINT)对膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子分泌的影响及其机制。方法:根据处理方法将人膝关节软骨细胞随机分为对照组(NC组)、白细胞介素(IL)-1β处理组(IL-1β组)、IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT组、IL-1β+pcDNA组、IL-1β+anti-微小核糖核酸(miR)-628-5p组、IL-1β+anti-miR-NC组、IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT+miR-NC组和IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT+miR-628-5p组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA LINC-PINT和miR-628-5p表达；流式细胞仪检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(bax)和裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达；酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6水平；双荧光素酶报告实验检测lncRNA LINC-PINT和miR-628-5p的靶向关系。两组间比较行 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:IL-1β组lncRNA LINC-PINT表达低于NC组(0.35±0.03比1.00±0.11)，miR-628-5p表达高于NC组(2.13±0.15比0.97±0.06)，差异有统计学意义( t＝17.103、18.804， P<0.05)。IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT组细胞活性高于IL-1β+pcDNA(1.08±0.07比0.57±0.04)，bax(0.41±0.04比0.82±0.07)、cleaved Caspase-3(0.46±0.03比0.91±0.06)、细胞凋亡率[(9.72±0.72)%比(25.38±2.31)%]、TNF-α[(93.51±8.36) pg/ml比(218.76±18.03) pg/ml]和IL-6[(102.18±8.72) pg/ml比(263.91±22.56) pg/ml]水平低于IL-1β+pcDNA组，差异有统计学意义( t＝29.122、15.356、10.422、11.753、6.755、16.023， P<0.05)。IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT+miR-628-5p组miR-628-5p(1.95±0.16比1.00±0.10)、bax(0.91±0.06比0.42±0.03)、cleaved Caspase-3(0.82±0.08比0.46±0.05)、细胞凋亡率[(26.38±2.15)%比(9.61±0.78)%]、TNF-α[(197.53±18.35) pg/ml比(91.35±8.26) pg/ml]和IL-6水平[(228.67±19.84) pg/ml比(101.54±8.39) pg/ml]高于IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT+miR-NC组，细胞活性低于IL-1β+pcDNA-lncRNA LINC-PINT+miR-NC组，差异有统计学意义( t＝15.105、16.771、12.746、12.414、21.997、15.8002、17.705， P<0.05)。 结论:lncRNA LINC-PINT可通过靶向下调miR-628-5p抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌，促进细胞增殖。

目的 观察缺氧对发生内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)的人单核巨噬细胞(human mononuclear mac-rophages,T HP-1)免疫功能的影响并探讨其可能机制.方法 T HP-1细胞接受革兰氏阴性菌脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)一次打击后分为四组.空白组:去除干预因素后继续培养,缺氧组:在空白组基础上予以氯化钴(CoCl2)处理,对照组:在空白组基础上予以LPS二次打击以形成ET,实验组:在空白组基础上给与缺氧及LPS二次打击.收集各组细胞总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time-polymerase chain reac-tion,qPCR)检测白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素10(inter-leukin-10,IL-10)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、CD80、CD40、胶原结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,MARCO)及缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α).收集各组细胞上清液,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IL-1β、IL-12、IL-10及TGF-β1表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞因子CD80、CD40、MARCO及HIF-1α蛋白表达.结果 qPCR结果显示,与对照组相比,实验组IL-1β、IL-12、CD80及CD40转录上调(P<0.05);但IL-10、TGF-β1及MARCO的转录下调(P<0.05).ELISA结果显示,与对照组相比,实验组IL-1β及IL-12分泌增加、IL-10及TGF-β1减少(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,实验组CD80及CD40蛋白表达增加、MARCO蛋白表达减少(P<0.05).与空白组和缺氧组相比,实验组及对照组的HIF-1α基因转录及蛋白表达均增加(P<0.05);但与对照组相比,实验组HIF-1α基因转录及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 缺氧可破坏LPS诱导的THP-1细胞ET状态,从而加重炎症反应,该现象可能未通过影响HIF-1α而实现.