目的 建立并验证基于4%中性甲醛固定肝组织制备肝细胞的大鼠肝微核实验(LMNT)方法(甲醛固定-LMNT法).方法 ①SD大鼠分为雌性和雄性组,然后分别随机分为溶剂对照组和肝微核阳性化合物N-亚硝基二乙胺(DEN)12.5 mg·kg-1组,每组5只,分别ig给予生理盐水和DEN,每天1次,连续14d后取肝组织,同时用胶原酶消化-LMNT法和甲醛固定-LMNT法检测微核化肝细胞数量和处于有丝分裂期肝细胞数,分别计算肝细胞微核率和有丝分裂指数,肝细胞微核率>0.07%判定为阳性结果.②雄性SD大鼠分为喹啉(30,60和120 mg·kg-1)组、N-亚硝基吡咯烷(NPYR,25,50和100 mg·kg-1)组、各自溶剂对照组(NPYR,去离子水;喹啉,玉米油)及阳性对照DEN(12.5 mg·kg-1)组,每组5～6只,连续ig 15 d.每日记录体重,实验结束取肝记录肝总重,计算肝系数.自动生化分析仪检测肝功能相关血清生化指标谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性和血清总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)的水平.采用胶原酶消化-LMNT法和甲醛固定-LMNT法测定肝细胞微核率,用外周血微核实验和肝彗星实验评价喹啉和NPYR遗传毒性.结果 ①与各自溶剂对照组的肝细胞微核率(0.069%和0.030%)相比,甲醛固定-LMNT法测得的DEN组雄性大鼠肝细胞微核率为1.10%,雌性大鼠为0.82%,均显著升高(P<0.05);与各自溶剂对照组(0.060%和0.030%)相比,胶原酶消化法-LMNT法测得的DEN组雄性大鼠肝细胞微核率为1.45%,雌性大鼠为0.46%,均显著升高(P<0.05),判定为阳性.2种方法中雄性大鼠的肝细胞微核率均显著高于雌性(P<0.05).与各自溶剂对照组相比,2种方法测得的DEN组雄性和雌性大鼠肝细胞有丝分裂指数均无明显差异.②与溶剂对照组相比,NPYR 50和100 mg·kg-1组大鼠体重在ig第 7～14天显著降低(P<0.01),DEN组在ig第8～14天显著降低(P<0.01);喹啉120 mg·kg-1组大鼠在ig第4～14 天显著降低(P<0.01),DEN组在ig第10～14天显著降低(P<0.05).与溶剂对照组相比,NPYR 100 mg·kg-1组(P<0.01)和DEN组(P<0.05)的肝重和肝系数均显著降低;喹啉60和120 mg·kg-1组肝重(P<0.01)和肝系数(P<0.05)均显著增加.与溶剂对照组相比,DEN组大鼠血清T-BIL水平显著升高(P<0.01),NPYR 100 mg·kg-1组GPT、GOT活性和D-BIL、T-BIL水平均显著升高(P<0.01),NPYR 25,50 mg·kg-1和喹啉各剂量组则均无显著差异.甲醛固定-LMNT法测得的NPYR组肝细胞微核率较胶原酶消化-LMNT法略高,均判定为阳性;与溶剂对照组相比,2种方法测得的NPYR组肝细胞微核率均显著增加(P<0.05),喹啉组结果相当,均判定为阳性;2种方法测得的喹啉组肝细胞微核率均显著增加(P<0.05).2种方法测得的NPYR和喹啉组肝细胞微核率相关性较好(R2分别为0.8614和0.9279).NPYR组外周血微核实验为阴性,彗星实验结果为阳性;喹啉组外周血微核实验和彗星实验结果均为阴性.结论 初步建立并验证了甲醛固定-LMNT法,且该方法检测肝致癌物的灵敏度与胶原酶-LMNT法相近.

目的:设计一种核化生应急救援关键护理技术培训平台,以为核化生应急救援护理人员提供专业的技术培训.方法:该平台采用浏览器/服务器(Browser/Server,B/S)架构进行设计,服务端采用C#语言开发,用户界面采用HTML5技术搭建,交互逻辑通过JavaScript语言编写.整个平台包括视频课堂、课后测试和模拟训练3个功能模块.结果:该平台能够实现核化生应急救援关键护理技术(包括理论和操作)的培训及考核,且不受时间、空间、师资等因素的限制,有利于提高培训效果.结论:该平台能够满足核化生应急救援护理关键技术培训的需求,为核化生应急救援护理人员的培训提供了有力的工具.

茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展.为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体杂交育种体系,但是部分茯苓菌株子实体形成困难或子实体贴生,导致担孢子收集困难,因此原生质体单核化的研究具有重要意义.本研究以两株存在较大遗传差异且同核体类型不同的菌株 776 和 775 为材料,核荧光染色表明超过60%的原生质体具有细胞核,原生质体再生率分别为11.0%和7.6%,不易生长的再生菌株中既有同核也有异核菌株.原生质体单核化获得了两个菌株的同核体菌株,比例可达到10%以上,菌株776 获得了两种交配型的同核体菌株(5:3),不存在偏分离(χ2=0.5),但菌株 775 原生质体单核化仅获得了一种交配型的同核体菌株,表现出严重的交配型偏分离.通过杂交菌株与两亲本对峙试验及基于rpb2 的杂合位点验证,证实获得了原生质体同核体杂交菌株 25 株,原生质体同核体与单孢同核体杂交菌株 50 株,表明茯苓原生质体同核体杂交育种的可行性.

在斑玉蕈Hypsizygus marmoreus双核体菌株原生质体单核化过程中会存在大量出现的单核体和极少出现的单核体.为方便研究,将大量出现的单核体定义为强势核,极少出现的单核体定义为弱势核.为了研究这些不同类型的细胞核对斑玉蕈节孢子遗传转化效率的影响,将本研究室前期原生质体单核化工作中分离的 10 株强势核单核体和弱势核单核体菌株分别进行两两配对杂交,获得5株强势核重组异核体构成供试菌株Q组,以及5株弱势核重组异核体构成供试菌株R组,利用这些新的重组异核体菌株展开节孢子遗传转化实验.实验统计结果显示,Q组中 5 株强势核重组异核体Q1A、Q1B、Q2A、Q3A和Q3B的转化效率分别为 81%、59%、57%、56%和 53%,R组中的5株弱势核重组异核体R1A、R2A、R2B、R3B和R4B的转化效率分别为45%、45%、44%、46%和41%,Q组5株强势核重组异核体的转化效率均高于R组5株弱势核重组异核体,且Q组菌株的平均转化效率为61%,显著高于R组的平均转化效率44%.这种单核菌株间遗传转化效率存在明显差异的机制还需要进一步研究.

细胞多核化是指一个细胞的细胞质中同时存在两个或多个细胞核[1-5].细胞多核化现象的产生通常是由于处于基因组复制中的细胞,其染色体运动发生异常,形成了不同大小的细胞核.这些大小不一的细胞核均被核膜包裹,对于比较小的细胞核,通常称为微核或核片段.细胞多核化现象既存在于病理状态的细胞,也可以存在于生理状态的细胞中.研究发现:细胞多核化现象与多种疾病相关.病理检验中发现多核化的巨型细胞的存在与慢性炎症有关[6-7].另外,细胞多核化提示细胞染色体的不稳定,所以细胞多核化现象也频繁出现在肿瘤细胞中[8-9].

为应对核化生攻击,野战医院发展"三防"技术与装备已成为亟待解决的重大课题,用于野战医学救援的"三防"野战医院逐渐得到发展.为此,以核化生防控关键技术与装备为主线,结合帐篷式野战医院及野战医疗方舱,对近年来国内"三防"野战医院技术与装备的发展现状与特点进行剖析,同时以美军核化生防护技术与装备为例,分析国外"三防"装备状况并进行对比;在此基础上,展望我国野战医院"三防"技术发展.

面对可能不期而遇的核化生污染的伤员,作为承担日常临床医学救治任务的队员,如何展开正确和高效的洗消和清创工作,成为核化生突发事件发生后应急和后续救治的关键[1].1 手术前准备在风力较大的野战环境下,伤员通道要保持相对洁净,需关闭靠近手术床位置的帐篷(图1)入口A、C及一侧窗口1、2、3,伤员由B口进入,治疗处置后由D口后送,以保证伤员快速通过后送时帐篷内的空气流动相对稳定.医疗组接到任务紧急到达指定地域,在事故发生地域上风方向迅速展开重伤、轻伤两顶帐篷.备足可能使用的各种手术器械包,帐篷内物品的安放要到位,最好使用一次性无菌物品.

目的:探讨“三防”医学救援队洗消组存在的问题,以提高核化生的洗消效率.方法:从多角度深入分析“三防”医学救援队在建设上面临的洗消装备系统化、智能化程度低以及人员培训不够完善等方面的问题.结果:提出了洗消装备要朝着标准化、系统化、智能化和人性化的方面不断发展及人员制度化培训要不断加强的改进意见.结论:“三防”医学救援队洗消效率的提高涉及多方面的因素,因此需要多管齐下,不断加强技术、装备、人员等方面的建设,才能促进洗消效率不断提高,进而提升三防医学救援队的保障能力.

目的:设计一种新型便携式洗消器,以解决现有洗消器功能单一、洗消液不能回收处理和易造成二次污染等问题.方法:便携式洗消器主要由机架、万向轮、洗消器主机和喷刷机构组成,通过在喷刷机构的喷刷头上设置可调喷淋头、电动刷和废液回收斗,实现一次喷淋清洗与电动刷高速旋转二次刷洗功能相结合的双重清洗功能,同时,将所产生的洗消废液进行回收,并有针对性地设置加压、加温、雾化等多种清洗模式.结果:该洗消器可快速对核化生污染物品进行洗消与洗消液回收,清洗力度大,工作效率高.结论:该洗消器适合突发性核化生等公共卫生事件的洗消使用,其污染物回收功能可防止环境污染和病毒、病菌的传播扩散,实用性较强.

“三防”医学救援从作为战略、战役支援保障力量,主要担负平战时核化生武器袭击和突发事件的特种医学救援保障任务[1].野外驻训作为部队实战化训练的重要内容,是检验平时训练效果和部队战斗力的重要方式和手段.按照上级统一部署,某部“三防”医学救援队于2015年夏季在某民兵训练基地开展了野外驻训,这次训练使救援队整体保障能力得到全面检验,快速救援水平得到全面提升.为总结野外驻训的实践经验,解决暴露的问题,进一步提升训练水平,笔者对有关问题进行了思考,现报告如下.