目的 评价伊马替尼对内毒素血症急性肺损伤小鼠的影响.方法 采用随机数字表法将60只8～12周龄的SPF级雄性C57BL/6小鼠分为4组(n=15):对照组(C组)、伊马替尼组(I组)、内毒素血症组(LPS组)和伊马替尼+内毒素血症组(I+LPS组).复制内毒素血症急性肺损伤小鼠模型,24 h后处死小鼠,观察小鼠肺组织病理学检测结果并进行肺损伤评分,测量肺组织湿/干比;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达;试剂盒检测肺组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)水平;Western blot法分析肺组织核转录因子κ B(NF-κ B)的磷酸化水平、核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达水平.结果 与C组相比较,LPS组的肺湿/干比比值[(3.47±0.41)vs.(5.58±0.47)]及肺损伤评分[(1.25±0.89)vs.(10.25±1.75)]升高(P＜0.05),血清中 TNF-α 和 IL-6 水平上调(P＜0.05),SOD、CAT、GSH、GSH/GSSG 水平降低(P＜0.05),MDA水平增加,p-NF-κB、Nrf2和HO-1蛋白表达上调(均P＜0.05);与LPS组比较,I+LPS组肺W/D 比值[(5.58±0.47)vs.(4.62±0.38)]及肺损伤评分[(10.25±1.75)vs.(7.00±1.31)]下降(P＜0.05),血清 TNF-α 和 IL-6 水平下降(P＜0.05),SOD、CAT、GSH、GSH/GSSG 水平升高(P＜0.05),MDA水平下调(P＜0.05),p-NF-κ B蛋白表达下降,Nrf2和HO-1蛋白表达升高(P＜0.05).结论 伊马替尼可改善脓毒症急性肺损伤,其机制可能与抑制氧化应激有关.

目的 探究圣草次苷对颈动脉粥样硬化(CAS)大鼠氧化应激和炎症反应的影响,并探讨其作用机制.方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、圣草次苷低剂量组、圣草次苷中剂量组、圣草次苷高剂量组、圣草次苷高剂量+Brusatol组,每组10只.构建CAS大鼠模型,检测各组大鼠血脂指标三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),苏木精-伊红(HE)染色观察颈动脉组织病理变化,油红O染色观察颈动脉组织脂质堆积情况,试剂盒检测氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT),酶联免疫吸附试验检测活性氧(ROS)及炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白质免疫印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/醌氧化还原酶1(NQO1)/血红素加氧酶1(HO-1)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠颈动脉组织内膜增厚,动脉粥样硬化斑块和脂质沉积增加,TG、TC、LDL-C、脂质堆积比例、IL-1β、TNF-α、MDA、ROS、p-NF-κB、p65/NF-κB p65 水平上升,HDL-C、IL-10、SOD、CAT、p-Nrf2/Nrf2、NQO-1、HO-1 下降(P＜0.05);与模型组相比,圣草次苷低、中、高剂量组颈动脉组织内膜相对完整,动脉粥样硬化斑块和脂质沉积减少,TG、TC、LDL-C、脂质堆积比例、IL-1β、TNF-α、MDA、ROS、p-NF-κB p65/NF-κB p65 水平下降,HDL-C、IL-10、SOD、CAT、p-Nrf2/Nrf2、NQO-1、HO-1 上升(P＜0.05);Brusatol 逆转圣草次苷对 CAS 大鼠氧化应激和炎症反应的改善(P＜0.05).结论 圣草次苷能调节CAS大鼠的血脂水平,抑制炎症反应和氧化应激,其作用机制可能与调节Nrf2/NQO-1/HO-1/NF-KB信号通路有关.

目的:探究甘草甜素(GL)调节多巴胺D2受体(Drd2)/α-B晶状体蛋白(Cryab)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的治疗作用.方法:从60只产后第7d的新生大鼠中选取12只为假手术组,其余新生大鼠均采用Rice-Vannucci法建立HIBD新生大鼠模型.将造模成功的36只新生大鼠采用随机数字表法分为HIBD组、GL组、氟哌啶醇组(Drd2抑制剂),每组12只.对各组新生大鼠进行神经功能缺损评分及脑含水量测定;苏木素-伊红染色法(HE)及尼氏(Nissl)染色观察海马组织病理改变;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测神经细胞凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;免疫印记法(Western blot)检测海马组织中Drd2/Cryab/NF-κB通路蛋白表达.结果:与假手术组比较,HIBD组海马CA1结构模糊不清,神经元排列无序,尼氏小体数量减少,神经功能缺损评分、脑含水量、神经元凋亡率、TNF-α、IL-6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高,Drd2、Cryab蛋白表达降低(P＜0.05);与HIBD组比较,GL组神经元排列相对整齐,尼氏小体数量增多,神经功能缺损评分及脑含水量、神经元凋亡率、TNF-α、IL-6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低,Drd2、Cryab蛋白表达升高(P＜0.05);与GL组比较,氟哌啶醇组上述指标均显著逆转(P＜0.05).结论:GL可抑制HIBD新生大鼠炎症反应和神经细胞凋亡,减轻HIBD新生大鼠神经损伤,其作用机制可能与激活Drd2/Cryab/NF-κB信号通路有关.

目的 探讨未足月胎膜早破患者胎盘Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白表达与绒毛膜羊膜炎感染的发生、分期的关系及母婴结局.方法 回顾性分析2020年6月—2023年6月新乡市中心医院收治的263例未足月胎膜早破患者的临床资料,根据是否为绒毛膜羊膜炎感染分为绒毛膜羊膜炎感染组/非绒毛膜羊膜炎感染组(98例/165例);采用免疫印迹试验检测胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白表达水平;比较绒毛膜羊膜炎感染组和非绒毛膜羊膜炎感染组胎盘TLR4、NF-KB、TRAF6蛋白表达水平;比较绒毛膜羊膜炎早期组、中期组和晚期组胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白表达水平;比较绒毛膜羊膜炎感染组和非绒毛膜羊膜炎感染组母婴结局;采用Spearman法分析未足月胎膜早破患者胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6水平变化与不同分期绒毛膜羊膜炎感染的相关性.结果 绒毛膜羊膜炎感染组胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白水平均高于非绒毛膜羊膜炎感染组(P＜0.05);中期组和晚期组胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白水平较早期组高(P＜0.05),晚期组胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白水平较中期组高(P＜0.05);绒毛膜羊膜炎感染组宫内窘迫、产后出血、羊水过少、呼吸窘迫综合征、新生儿窒息、死亡占比均高于非绒毛膜羊膜炎感染组(P＜0.05);Spearman相关性分析结果显示,TLR4、NF-κB、TRAF6水平与绒毛膜羊膜炎分期呈正相关(P＜0.05).结论 未足月胎膜早破患者绒毛膜羊膜炎感染后胎盘TLR4、NF-κB、TRAF6蛋白水平呈高表达,三者与绒毛膜羊膜炎分期密切相关,且未足月胎膜早破患者绒毛膜羊膜炎感染对母婴结局不利.

目的 探讨单核细胞中Toll样受体(TLR)、核因子-κB(NF-κB)表达水平与2型糖尿病(T2DM)患者自主神经病变的相关性.方法 选择2021年4月至2022年12月濮阳市人民医院收治的112例T2DM患者为观察组,另选择同期在本院进行体检的50例健康志愿者为对照组.采用反转录聚合酶链反应检测2组受试者血浆单核细胞中TLR2、TLR4、NF-κB表达水平.根据是否并发有自主神经病变将观察组患者分为自主神经病变组(n=46)和无自主神经病变组(n=66),比较2组患者的临床资料,将差异有统计学意义的指标进一步行多因素logistic回归来分析T2DM患者发生自主神经病变的危险因素;采用Spearman相关分析TLR2、TLR4、NF-κB表达水平与T2DM患者发生自主神经病变的相关性.结果 观察组患者单核细胞中TLR2、TLR4、NF-κB水平显著高于对照组(P＜0.05).单因素分析结果显示,自主神经病变组与无自主神经病变组患者的年龄、单核细胞/高密度脂蛋白比值(MHR)及胱抑素C、TLR2、TLR4、NF-κB水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).多因素logistic回归分析结果显示,MHR、TLR2、TLR4、NF-κB是T2DM患者发生自主神经病变的危险因素(P＜0.05).Spearman相关分析结果显示,TLR2、TLR4、NF-κB水平与T2DM患者发生自主神经病变呈正相关(r=0.825、0.822、0.819,P＜0.05).结论 TLR2、TLR4、NF-κB在T2DM患者中表达上调,TLR2、TLR4、NF-κB表达水平与T2DM患者自主神经病变有关.

目的 通过观察沉默Periostin后小鼠成骨细胞中特异性转录因子(Runx2)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)表达变化,探讨其影响破骨活性的分子机制.方法 将小鼠成骨细胞株(MC3T3-E1)分为实验组和对照组,实验组使用LVpFU-GW-016PSC66473-1病毒转染,对照组用pFU-GW-016PSC53349-1病毒,保持两组细胞状态相当.用MDC法检测基因沉默效果,Western blot法检测两组细胞Runx2、RANKL和OPG蛋白表达情况.结果 沉默Periostin后发现:实验组荧光表达较对照组明显增强(P＜0.01);实验组Runx2和RANKL蛋白表达较对照组明显下调(P＜0.05);OPG蛋白表达较对照组显著升高(P＜0.05).结论 沉默Periostin可改变小鼠成骨细胞RANKL和OPG表达,并可能通过核因子-κB(NF-κB)信号通路介导影响Runx2基因,增强成骨细胞功能并抑制骨破坏.

目的 探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、Toll样受体-4(TLR-4)和核转录因子κB(NF-κB)联合评估非小细胞肺癌(NSCLC)放射性肺炎(RP)病情严重程度的价值.方法 选取104例NSCLC放疗后继发RP患者作为研究组,另选取52例NSCLC放疗后未继发RP患者作为对照组.比较2组患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平.比较研究组不同程度RP患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平,分析各血清指标单独及联合评估NSCLC放疗后RP病情程度的价值.结果 放疗结束后,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);放疗结束后,随着RP病情程度的增加,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平呈升高趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平评估1级RP的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.718、0.783、0.801,评估≥2级RP的AUC分别为0.729、0.740、0.793、0.825;血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB阳性表达患者发生≥2级RP的风险分别是阴性表达患者的2.473、2.275、2.610、5.267倍(P＜0.05);血清 TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB 联合评估≥2 级 RP 的 AUC 为 0.939,敏感度为 76.00％,特异度为 97.47％.结论 NSCLC患者放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均与RP病情严重程度呈正相关,四者联合评估≥2级RP的价值显著,可为临床控制RP病情提供参考依据.

体外模拟肠道缺氧微环境探索葛根芩连汤(GQD)抑制炎症性缺氧下巨噬细胞M1极化的效应及作用机制.利用三气培养箱模拟结肠正常生理性缺氧和溃疡性结肠炎(UC)炎症性缺氧微环境,将RAW264.7 巨噬细胞分为18.5％O2(常氧)组、4％O2(生理性缺氧)组、1％O2(炎症性缺氧)组,脂多糖(LPS)诱导24 h,流式细胞术检测M1极化情况.在1％炎症性缺氧条件下分为空白组,模型组,葛根芩连汤含药血清低、中、高剂量组,流式细胞术检测M1极化标志物CD86,ELISA法检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达;qRT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、TNF-α、IL-1β mR-NA表达;Western blot检测HIF-1α/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达情况;免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况.结果表明,1％O2组CD86阳性率最高;1％炎症性缺氧条件下,与空白组相比,模型组CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达升高,与模型组比较,GQD各剂量能降低CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达.与空白组比较,模型组HIF-1 α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IKBα蛋白表达升高;与模型组比,GQD各组HIF-1α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IKBα蛋白表达明显降低.与空白组比较,模型组NF-κB p65入核明显;与模型组比较,GQD各剂量显著降低NF-κB p65入核表达.研究表明1％炎症性缺氧条件下GQD可能通过下调HIF-1α/NF-κB信号通路抑制M1巨噬细胞极化及相关炎症因子分泌发挥保护肠道作用.

骨结核是一种严重危害人体健康的骨科感染性疾病,其病灶组织破坏的最大特点是骨质的吸收及破坏,其中破骨细胞是骨吸收的主要细胞.破骨细胞是由造血干细胞分化而来的多核细胞,通常是由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-KB ligand,RANKL)与核因子 κB 受体活化因子(receptor activa-tor for nuclear factor-KB,RANK)调控产生.结核分枝杆菌可以通过RANKL信号通路激活破骨细胞生成转录因子,以增强破骨细胞对骨质的吸收.笔者通过综述RANKL信号通路的结构及破骨细胞的研究进展,以及它们在骨结核临床治疗中可能发挥的潜在作用,为该领域的研究提供新的思路.

目的 探讨他替瑞林(Taltirelin,TAL)对帕金森病大鼠纹状体核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达与相关神经炎症的调控作用及其机制.方法 通过立体定向手术构建偏侧帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型;采用阿扑吗啡诱导旋转试验、跨步试验、酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydrox-ylase,TH)免疫组化染色等方法评估模型;将成功模型大鼠随机分为TAL组和对照组,分别每日1次给予腹腔注射3 mg/kg的TAL或等剂量生理盐水,连续1周,从对照组未损毁侧[对照-完整(Control-intact,CTR-Int)组]、对照组损毁侧[对照-损毁(Control-lesion,CTR-Les)组]以及TAL组损毁侧(TAL-Les组)的纹状体中提取RNA进行转录组分析,提取蛋白质并通过免疫印迹等技术检测NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65以及神经炎症因子白介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达水平.结果 相比于CTR-Int组,CTR-Les组的NF-κB信号通路中有19个基因表达上调,并且磷酸化NF-κB p65,IL-1β,MCP-1表达显著增多;相较于CTR-Les组,TAL-Les组的NF-KB信号通路中有21个基因表达下调,且磷酸化NF-κB p65,I--1β,MCP-1表达显著减少.结论 他替瑞林抑制了偏侧PD模型大鼠脑区NF-κB p65磷酸化与神经炎症的持续激活,这可能是TAL改善PD模型大鼠运动功能但未引起明显异动症等运动并发症的重要原因之一.