目的:探究LiaSR双组分信号转导系统对变异链球菌（Sm）593号（Sm 593）临床株耐酸和生物膜形成的影响及相关机制。方法:以Sm 593及其liaS和liaR基因敲除株为研究菌株，采用全自动生长曲线测定仪检测并绘制pH=5.5环境中各菌株的生长曲线；用菌落计数法检测细菌的适应性耐酸能力；使用Laurdan探针、氢-钾腺苷三磷酸（ATP）酶试剂盒、质子通透性检测实验和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）探究LiaSR双组分信号转导系统介导的耐酸机制。体外构建各菌株的生物膜，通过结晶紫染色法、菌落计数法、SYTOX探针检测法和蒽酮-硫酸法探究各菌株的生物膜总量、活菌数、胞外DNA（eDNA）和胞外多糖含量；采用RT-qPCR法检测胞外多糖合成相关基因的表达情况。结果:pH=5.5环境中，liaS和liaR基因敲除株的生长受到显著抑制（ P<0.05）。适应性耐酸曲线显示敲除株与野生株相比，固有耐酸和适应性耐酸能力均显著下降（ P<0.05）。对三菌株无预酸化处理20和40 min以及预酸化处理20和40 min后，liaS基因敲除株生存率［（8.98±2.00）%、（0.18±0.07）%、（14.88±8.64）%、（0.82±0.91）%］和liaR基因敲除株生存率［（0.38±0.19）%、（0.34±0.18）%、（7.89±2.02）%、（1.52±0.37）%］均分别显著低于野生株［（32.49±9.75）%、（1.27±0.32）%、（62.76±29.06）%、（8.02±1.25）%］（均 P<0.05）。此外，liaS和liaR敲除株膜流动性（0.18±0.04和0.18±0.05）均显著低于野生株（0.08±0.05）（均 P<0.01）；不饱和脂肪酸合成基因fabM表达水平（0.52±0.11和0.57±0.05）与野生株（1.04±0.30）相比均显著降低约1/2（均 P<0.001）；H +-ATP酶活性（917.06±59.53和469.53±47.65）与野生株（127.00±50.71）相比显著升高7.22和3.70倍（均 P<0.001），且编码H +-ATP酶基因atpD的表达水平（3.39±0.21和1.94±0.17）也较野生株（1.00±0.15）显著升高3.39和1.94倍（均 P<0.01）。liaR基因敲除株的终末pH值（4.76±0.01）显著低于野生株（4.90±0.00），liaS基因敲除株的终末pH值（5.19±0.01）显著高于野生株（均 P<0.001）。liaS和liaR基因敲除株与野生株相比，Sm 593生物膜总量未发生明显变化，生物膜活菌数均显著少于野生株（均 P<0.05），且eDNA含量均显著高于野生株（均 P<0.01）。liaS基因敲除株生物膜水溶性多糖含量与野生株相比显著增加1.88倍（ P=0.003）。liaS和liaR基因敲除株胞外多糖合成相关基因gtfD表达水平较野生株显著升高47.43和16.90倍（均 P<0.05），liaS基因敲除株中gtfC基因比野生株显著高表达1.65倍（ P=0.014）。 结论:LiaSR双组分信号转导系统通过调控膜不饱和脂肪酸合成和胞膜流动性，参与Sm 593的耐酸过程；LiaR反应调节蛋白还可参与调节膜质子通透性，增强Sm 593的耐酸能力；此双组分信号转导系统可负向调控生物膜胞外基质的产生。

山奈素是一种具有多种生物活性和药理作用的天然产物,已被广泛应用于炎症性肠病、动脉粥样硬化、糖尿病、恶性肿瘤、骨关节炎和神经退行性疾病等的治疗研究.但因水溶性小、生物利用度低、化学稳定性差等缺点限制了山奈素的临床应用.包括无机纳米粒、聚合物纳米粒、脂质纳米粒等的纳米递送载体,已经成为提高山奈素药理活性、靶向性以及生物利用度的有效方法,为临床相关疾病的治疗提供了更优质的选择.本文将归纳总结山奈素及其纳米制剂的应用及疗效,以期为山奈素的临床转化奠定理论与技术基础.

壳寡糖(COS)作为天然多糖壳聚糖(CS)的降解产物,既保留了 CS的良好生物相容性、无毒和可生物降解等特点,同时由于糖链缩短使相对分子质量降低,其水溶性和生物活性均得到提高且更容易被生物体吸收利用,近年来受到越来越多的关注.目前国内外学者对CS生物学功能的研究及其在生物医学领域中应用的报道较多,但对COS功能及其应用的研究报道较少.现结合国内外最新研究成果,对COS的主要生物学功能(抗炎、抗肿瘤、抗菌和促组织再生等)及其可能的作用机制进行总结和分析,并阐述其在生物医学领域中应用的研究进展,以期为COS的深入研究及其在生物医学领域中更广泛的应用提供理论依据和参考.

目的 优化甘草汁制灵芝炮制工艺,评价炮制前后体外抗氧化、抗炎活性变化.方法 基于响应面法,运用层次分析法(AHP)和熵权法确定最佳炮制工艺;采用ABTS+、DPPH、羟自由基清除率的方法,评价多糖组分的抗氧化活性;采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α及NO的含量,评价三萜及甾醇组分的抗炎活性.结果 最佳炮制工艺为 1∶13 的甘草汁比例、4.4%的甘草用量以及 33 min的浸泡时间,炮制后总三萜及甾醇、水溶性浸出物的含量升高(P<0.01,P<0.05);炮制后的抗氧化活性增强(P<0.01);对炎症因子的抑制作用也优于生品.结论 所得炮制工艺稳定、可行;甘草汁制可促进灵芝成分溶出,协同其抗氧化、抗炎作用,且其抗炎活性的增强可能与麦角甾醇的溶出增加有关.

为全面了解及利用我国枸杞属植物资源,该研究以枸杞属不同种植物干燥成熟果实为研究对象,比较其糖类、蛋白质类、类胡萝卜素类、有机酸类及酚类化学组分组成及含量,并结合果实百粒重、果形指数及籽实比性状指标,分析其"化学-性状"相关性.研究结果表明,不同种枸杞其化学成分主要组成类别具有差异,如截萼枸杞、黄果枸杞及红枝枸杞为单糖优势种;宁夏枸杞及黄果枸杞为总多糖优势种,且宁夏枸杞为枸杞红素绝对优势种;云南枸杞与北方枸杞干果为可溶性蛋白质优势种;截萼枸杞、新疆枸杞及宁夏枸杞为有机酸类及酚类优势种;宁夏枸杞、黄果枸杞为枸杞属中大果优势种;云南枸杞及枸杞为多籽劣势种.多糖类、类胡萝卜素类、果实百粒重、籽实比、东莨菪素、果糖、5-O-阿魏酰奎宁酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷、东莨菪苷、隐绿原酸及咖啡酸被认为是不同种干果间主要差异指标.相关性分析结果表明,果实百粒重与东莨菪苷及总多糖含量呈强正相关;籽实比与琥珀酸、水溶性蛋白质及玉米黄素含量呈强正相关性,与芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、果糖及葡萄糖含量呈强负相关,表明不同化合物在枸杞果实中分布趋势不同.该研究系统分析比较了枸杞属8个不同种果实化学组分及性状差异,可为枸杞属植物全面开发利用及品种定向选育和精细化、高值化利用提供参考依据.

火麻仁为药食同源中药,应用历史久远,含有丰富的火麻油、大麻素类、木脂素酰胺类、火麻蛋白、多糖等成分,具有润肠通便的功效,在食品和医药领域都表现出较好的开发前景.笔者通过查阅近10年火麻仁的相关文献报道,对其主要水溶性活性蛋白质与糖类的最新研究进行了分析整理,发现火麻仁蛋白是一种优质的植物蛋白,主要由天冬氨酸、精氨酸、赖氨酸等氨基酸构成,具有通便、抗疲劳、抗衰老、抗氧化等药理作用,可通过碱提(酸沉)法、盐析法、酶解法等方法提取纯化,毒理学研究证实其应用较为安全;火麻仁中水溶性总糖含量约为3%～6%,主要具有免疫调节及抗氧化作用,可通过微波辅助提取进行制备,但相关单糖组成、糖链连接等结构研究还未深入开展.

目的:评价三个玫瑰果用新品种(无刺玫一号、丰果玫三号、丰果玫六号)的果实质量.方法:对无刺玫一号、丰果玫三号、丰果玫六号进行植物形态特征及果实性状描述;采用紫外分光光度法测定总糖、水溶性多糖、总酚、总黄酮、总三萜、类胡萝卜素含量;利用高效液相色谱法(HPLC)测定芦丁、槲皮素、白桦脂酸、熊果酸、齐墩果酸含量.采用熵权TOPSIS法综合评价玫瑰果用新品种果实质量.结果:玫瑰三个果用新品种在植物形态以及果实大小、形状、颜色上均有差异;无刺玫一号果实中类胡萝卜素和白桦脂酸含量最高,分别为 19.39、0.85 mg/g;水溶性糖、总黄酮、总酚酸、芦丁在丰果玫三号果实中含量最高,分别为 24.84、44.36、6.81、0.46 mg/g;总三萜、熊果酸、齐墩果酸、槲皮素在丰果玫六号中含量最高,分别为 33.47、2.64、0.48、0.02 mg/g.熵权TOPSIS法分析结果显示,相对贴近度排名为丰果玫三号、无刺玫一号、丰果玫六号、传统花用玫瑰、紫枝花用玫瑰.结论:通过观察三个玫瑰果用新品种植物形态、果实性状,可以区分三个新品种;三个玫瑰果用新品种果实有效成分含量排名比花用种质果实有效成分含量排名靠前.综合分析,丰果玫三号、无刺玫一号、丰果玫六号均有一定的开发价值.

目的 筛选紫苏叶发挥保肝活性的关键组分并探究其作用机制.方法 小鼠随机分为 8 组,正常组和模型组灌胃PBS,给药组分别灌胃 30 mg/kg奥贝胆酸阳性药和120 mg/kg紫苏叶水煎液、醇沉上清液、醇沉固体、总黄酮以及多糖,每天1 次,连续7d.末次给药后2h,各组小鼠(除正常组外)腹腔注射0.5%CCl4 花生油(10 mL/kg)进行造模.造模结束后,收集血清和肝脏组织,全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆红素(TBIL)水平,HE染色观察肝组织病理形态变化,试剂盒检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,RT-qPCR法检测肝组织NLRP3、半胱肽氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和IL-1β mRNA表达.结果 与模型组比较,紫苏叶固体组和总黄酮组小鼠血清ALT、AST活性和TBIL水平均降低(P<0.05,P<0.01),肝组织SOD活性和TGF-β1 水平升高(P<0.05,P<0.01),MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平和NLRP3、caspase-1、IL-1β mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01).结论 水溶性总黄酮是紫苏叶发挥保肝作用的关键活性组分,抑制 NLRP3/caspase-1 炎性小体信号通路可能是其抗 CCl4 致急性肝损伤的作用机制之一.

目的 优化炆黄精炮制工艺,并明确成分变化与外观色泽变化的关联规律.方法 以炆制时间、蒸制时间、黄酒用量为影响因素,多糖、总皂苷、5-羟甲基糠醛、醇溶性浸出物、水溶性浸出物的含量为评价指标,采用变异系数法结合层次分析法(AHP)计算各指标权重,得到综合评分,Box-Behnken响应面法优化炮制工艺.测定 17 批样品色度值,并对其主要化学成分与色度值之间进行相关性分析.结果 最佳条件为每 400 g黄精炆制时间 8h,蒸制时间5h,黄酒用量 15%.关联结果显示,L*值与多糖含量呈极显著正相关,与总皂苷、5-羟甲基糠醛含量呈显著正相关;a*值与醇溶性浸出物含量呈极显著负相关.结论 该方法合理可行,可用于炆黄精炮制工艺优化.炆黄精化学成分与色泽具有显著相关性.

目的 研究黔产苗药土党参趁鲜蒸制炮制工艺,明确最佳炮制工艺条件;探讨土党参蒸制前后对脾虚模型小鼠的改善作用,进一步为临床应用提供参考.方法 以党参炔苷、总多糖、醇溶性浸出物、水溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法,优选土党参趁鲜蒸制炮制工艺;采用"大黄苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度"联合法,建立小鼠脾虚动物模型,以参苓白术散为阳性对照,通过比较外观体征、脏器指数、负重游泳时间,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)的含量,研究土党参趁鲜蒸制前后对小鼠脾虚动物模型的影响.结果 不同炮制方法 对土党参内在质量影响较大,趁鲜蒸制法综合评分值最高,其中趁鲜蒸制20 min(0.8672)>趁鲜蒸制50 min(0.7252)>趁鲜蒸制40 min(0.6846);而烘干后蒸制60 min(0.0025)综合评分值最低.同时,生品和趁鲜蒸制品均可改善小鼠脾虚动物模型外观体征(P<0.05),提高脾脏脏器指数(P<0.05),延长负重游泳时间(P<0.05),降低AST、ALT、ALP、CRE、BUN含量(P<0.01),减少IL-4/IFN-γ水平(P<0.01),且趁鲜蒸制品作用强于生品(P<0.05).结论 土党参优选的炮制方法 为:取新鲜药材,洗净,趁鲜蒸制20 min后切厚片(2-4 mm),60℃烘干;趁鲜蒸制后对小鼠脾虚动物模型的改善作用较强.