目的:探讨卡格列净对射血分数保留型心力衰竭（HFpEF）大鼠心功能的影响及其对铁死亡机制的调控作用。方法:选取32只7周龄Dahl盐敏感大鼠，随机分为对照组（予低盐饲料）、HFpEF组（予高盐饲料）、卡格列净20组（予高盐饲料+卡格列净20 mg·kg -1·d -1）和卡格列净30组（予高盐饲料+卡格列净30 mg·kg -1·d -1），每组8只，监测各组大鼠体重、血压，于实验第10周行代谢笼检测，于实验第12周行超声心动图检查后处死大鼠，留取血液及左心室标本行HE染色、Masson染色、普鲁士蓝铁染色和活性氧染色，分别在光学显微镜下观察心肌细胞大小和形态、间质纤维化程度、铁染色及活性氧生成情况。另取切片在电子显微镜下观察心肌细胞超微结构，并应用Western blot法及实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠左心室心肌组织中铁死亡相关指标的蛋白及mRNA表达水平。 结果:适应性饲养1周后各组大鼠均全部存活。代谢笼结果示，与对照组相比，HFpEF组、卡格列净20组和卡格列净30组大鼠进食量、进水量及排尿量更多，体重较低（ P均<0.05）；这些变化在卡格列净20组和卡格列净30组比HFpEF组更显著；卡格列净20组与卡格列净30组相比，只有12周体重组间差异有统计学意义（ P<0.05）。HFpEF组大鼠第6、12周血压及第12周全心重量、左心室校正质量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高，而第12周二尖瓣舒张早期最大峰值速度与舒张晚期最大峰值速度比值较低（ P均<0.05）。HE染色、Masson染色结果示，与对照组比较，HFpEF组大鼠左心室心肌组织心肌纤维排列紊乱、细胞直径大［（0.032±0.004）mm比（0.023±0.003）mm， P<0.05］，且形态欠规则、间质胶原纤维增生明显、胶原容积分数较高（0.168±0.028比0.118±0.013， P<0.05）。与HFpEF组相比，卡格列净20组和卡格列净30组大鼠左心室心肌组织心肌纤维排列较整齐，心肌细胞形态较规则，细胞直径较小，胶原容积分数较低（ P均<0.05）。电镜下观察到，与对照组相比，HFpEF组大鼠心肌组织中大部分横纹肌发生断裂，Z线和M线不能明显区分，出现线粒体部分肿胀、膜增厚、嵴减少甚至消失等变化。卡格列净20组和卡格列净30组大鼠心肌组织横纹肌排列趋于规整，线粒体形态变化较轻。普鲁士蓝铁染色结果示，HFpEF组大鼠心肌组织中铁含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高。活性氧染色结果示，HFpEF组大鼠心肌组织中活性氧含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高。心肌组织生化示，HFpEF组大鼠心肌组织中Fe 2+含量、丙二醛含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高，而谷胱甘肽含量较低（ P均<0.05）。Western blot法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结果示，与对照组比较，HFpEF组大鼠心肌组织中转铁蛋白受体1（蛋白相对表达量：1.37±0.16比0.31±0.12）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（蛋白相对表达量：1.31±0.15比0.63±0.09）蛋白及mRNA表达水平较高，铁蛋白重链1（蛋白相对表达量：0.45±0.08比1.41±0.15）蛋白及mRNA表达水平较低（ P均<0.05）；上述指标在卡格列净20组与卡格列净30组间差异均无统计学意义（ P>0.05）。4组大鼠心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白及mRNA表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:卡格列净通过调控铁死亡机制改善HFpEF大鼠心功能。

目的:探究WNT1诱导信号通路蛋白1（WISP1）在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的功能定位及治疗作用机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠购于北京维通利华公司，采取简单随机抽样法分为5组，每组10只，正常组喂养普通饲料，通过喂养高脂高胆固醇饲料14周制备NASH小鼠模型，在造模过程中分别腹腔注射IgG单克隆抗体，0.1 g/kg WISP1高亲和力单克隆抗体，0.2 g/kg WISP-1高亲和力单克隆抗体为IgG、低剂量WISP1抗体组和高剂量WISP1抗体组，每周2次，连续给药14周。检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、血糖水平。苏木精-伊红（HE）、糖原（PAS）染色、油红O染色观察肝组织病理变化。实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测小鼠肝组织中白细胞介素（IL）-10、IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达水平。检测肝组织总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性水平，活性氧（ROS）荧光染色检测肝组织中活性氧含量；免疫组织化学（IHC）检测肝组织WISP-1、乙酰辅酶a合成酶（ACS）蛋白表达，蛋白质印迹法（Western blot）检测肝组织肝组织腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、肉碱棕榈酰转移酶-1（CPT1）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1（PCG-1α）蛋白表达水平。结果:模型组小鼠血清AST、ALT、血糖水平高于正常组[（245.01±57.57） U/L比（37.28±4.23） U/L、（218.96±55.27） U/L比（49.81±10.57） U/L、（25.73±2.29） mmol/L比（8.06±0.51） mmol/L， P<0.01]；模型组病理表现为肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润、多处坏死灶；模型组小鼠肝组织炎症因子（IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α）mRNA水平高于正常组（7.49±059比1.00±0.38、5.57±3.22比1.00±0.59、4.86±3.86比1.00±0.34、10.18±3.24比1.00±0.17， P<0.01）；MDA含量高于正常组[（3.75±0.40） nmol/ml比（2.22±0.24） nmol/ml， P<0.01]，GSH、SOD活性低于正常组[（0.22±0.06） ng/ml比（0.49±0.15） ng/ml、（2.19±0.23） pg/ml比（4.59±0.22） pg/ml， P<0.01]，ROS含量高于正常组（4.91±0.31比1.00±0.12， P<0.01）；同时PGC-1α、ACS蛋白表达高于正常组[（2.19±0.084比1.00±0.09、（62.97±2.38）%比（26.72±0.73）%， P<0.01]，CPT1表达低于正常组（0.55±0.01比1.00±0.13， P<0.01）。低、高剂量WISP1抗体组小鼠血清AST、ALT、血糖水平低于模型组[（65.53±25.85）、（53.49±12.22） U/L比（245.01±57.57） U/L，（73.93±23.670）、（60.88±23.38） U/L比（218.96±55.27） U/L，（20.07±2.03）、（16.46±3.71） mmol/L比（25.73±2.29） mmol/L， P<0.01]，低、高剂量WISP1抗体组小鼠肝脏脂肪变性、炎症细胞浸润、坏死程度降低，低、高剂量WISP1抗体组小鼠肝组织IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA低于模型组（2.98±0.31、2.579±0.22比7.49±1.57，1.83±0.35、2.53±0.32比5.57±1.03, 1.62±0.24、1.52±0.34比4.86±1.33，2.63±0.56、2.12±0.37比10.18±2.31， P<0.05），高剂量WISP1抗体组小鼠MDA含量低于模型组[（1.83±0.694） nmol/ml比（3.70±0.50） nmol/ml， P<0.01]，GSH、SOD活性高于模型组[（0.45±0.12） ng/ml比（0.22±0.06） ng/ml、（5.50±0.98） pg/ml比（2.19±0.40） pg/ml， P<0.01]，活性氧含量低于模型组（0.51±0.06比4.91±0.31， P<0.01）。低、高剂量WISP1抗体组PGC-1α、ACS蛋白表达低于模型组（1.22±0.16、1.07±0.05比2.19±0.08，（33.50±3.45）%、（35.38±3.65）%比（62.97±2.38）%， P<0.01），p-AMPK、CPT1表达高于模型组（2.61±0.363、2.47±0.36比1.04±0.14，1.23±0.23、1.27±0.03比0.55±0.01， P<0.01）。 结论:抗WISP1治疗能通过激活AMPK通路，介导PGC-1α/CPT1通路改善NASH小鼠肝脏脂质代谢，减少炎症和脂质过氧化，促进肝细胞修复。

目的:探讨左西孟旦在改善急性心肌梗死（acute myocardial infarction, AMI）伴心力衰竭患者氧供-氧耗中的作用。方法:回顾性收集宁波市医疗中心李惠利医院重症医学科（intensive care unit, ICU）2016年11月至2020年12月收治的AMI伴心力衰竭患者资料，根据是否应用左西孟旦分为观察组和对照组；记录两组治疗前及治疗后第3天、第7天的N末端B型脑钠肽原（NT-proBNP）、肝功能、血清肌酐（serum creatinine，Scr）、血管活性药物评分（vasoactive inotropic score, VIS）、GAP[P （v-a）CO 2，中心静脉-动脉血二氧化碳分压差]和GAP比值[P （v-a）CO 2/C （a-v）O 2，中心静脉-动脉血二氧化碳分压差/动脉与中心静脉氧含量差]等指标。根据计量资料是否服从正态分布，应用 t检验、Mann-Whitney U秩和检验或 χ2检验对两组数据进行统计分析。 结果:最终164例患者入选，其中观察组55例，对照组109例。两组患者在治疗前，NT-proBNP、Scr、VIS评分、ALT、AST、GAP和GAP比值均差异无统计学意义（ P>0.05）。治疗后第3天，两组NT-proBNP、Scr、ALT和AST差异无统计学意义（ P>0.05）；VIS评分、GAP和GAP比值观察组改善优于对照组，差异有统计学意义（ P<0.05）。治疗后第7天，两组ALT和AST差异无统计学意义（ P>0.05）；NT-proBNP、Scr、VIS评分、GAP和GAP比值观察组改善优于对照组，差异有统计学意义（ P<0.05）。观察组机械通气时间更短（ P<0.05）；两组28 d病死率和ICU住院时间差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:左西孟旦能改善ICU中AMI伴心力衰竭患者的心功能与肾功能，减少正性肌力药物用量，对肝功能影响小；同时在改善患者全身灌注及氧供-氧耗方面起一定作用。虽然左西孟旦能减少患者机械通气时间，但并不能改善28 d预后和减少ICU住院时间。

目的:探讨静脉-动脉血二氧化碳分压差与动脉-静脉血氧含量差比值（Pv-aCO 2/Ca-vO 2）对儿童原发性腹膜炎相关脓毒性休克预后的预测价值。 方法:采用回顾性研究，选取2016年12月至2021年12月西安交通大学附属儿童医院重症医学科收治的63例腹膜炎相关脓毒性休克患儿作为研究对象。以28 d全因病死率为主要终点事件，根据预后将患儿分为生存组及死亡组，统计两组基线资料及血气分析、血常规、凝血、炎症状态、危重评分等相关临床数据。对影响预后的因素进行多因素Logistic回归分析，并通过受试者工作特征曲线（ROC曲线）对危险因素的预测性进行检验。根据各危险因素的截断值进行分层，通过Kaplan-Meier生存曲线分析比较各组预后差异。结果:共纳入63例患儿，男性30例，女性33例；年龄（5.6±4.0）岁；28 d死亡16例，病死率为25.4%。生存者与死亡组间性别、年龄、体重及病原菌分布差异无统计学意义。死亡组机械通气比例、外科干预比例、血管活性药物应用比例、前降钙素原、C-反应蛋白、活化部分凝血活酶时间、血乳酸（Lac）、Pv-aCO 2/Ca-vO 2、儿童序贯器官衰竭评分、儿科危重症死亡危险评分Ⅲ均较存活组明显升高，血小板计数、纤维蛋白原、平均动脉压较生存组明显降低，差异均具有统计学意义。通过多因素Logistic回归分析筛选出Lac及Pv-aCO 2/Ca-vO 2为影响患儿预后的独立危险因素〔优势比（ OR）和95%可信区间（95% CI）分别为2.01（1.15~3.21）、2.37（1.41~3.22），均 P<0.01〕。ROC曲线分析显示，Lac、Pv-aCO 2/Ca-vO 2及二者联合的曲线下面积（AUC）分别为0.745、0.876和0.923，敏感度分别为75%、85%和88%，特异度分别为71%、87%和91%。根据各危险因素的截断值分层，Kaplan-Meier生存曲线分析显示，Lac≥4 mmol/L组28 d累积生存率低于Lac<4 mmol/L组〔64.29%（18/28）比82.86%（29/35）， P<0.05〕；Pv-aCO 2/Ca-vO 2≥1.6组28 d累积生存率低于Pv-aCO 2/Ca-vO 2<1.6组〔62.07%（18/29）比85.29%（29/34）， P<0.01〕。将两个指标变量分层组合后分析显示，Pv-aCO 2/Ca-vO 2≥1.6且Lac≥4 mmol/L组28 d累积生存率明显低于其他3组（Log-rank检验： χ2＝7.910， P＝0.017）。 结论:早期Pv-aCO 2/Ca-vO 2联合Lac对原发性腹膜炎相关脓毒性休克患儿的预后具有良好的预测价值。

目的:探讨构建自交联重组胶原蛋白水凝胶的可行性及其对紫外线诱导的光老化模型修复作用。方法:2023年3—12月，于西北大学陕西省可降解生物医学材料重点实验室，使用不同浓度的重组胶原蛋白通过自交联制备重组胶原蛋白水凝胶，表征了水凝胶材料的物理机械性能，用MTT法、溶血试验检测水凝胶生物相容性；建立人皮肤成纤维细胞光老化模型，通过RT-qPCR检测炎症因子及ECM生成、降解相关基因表达量探究水凝胶分子水平改善光老化效果。建立紫外照射小鼠光老化模型，通过大体观察以评估水凝胶改善光老化效果，通过HE染色观察水凝胶的组织兼容性和降解性，通过RT-qPCR及免疫荧光染色探讨水凝胶作用机制。结果:4 mg/ml、20 mg/ml和40 mg/ml的GEL-Ⅰ水凝胶均表现出良好的物理机械性能。生物相容性研究显示不同浓度的水凝胶细胞存活率>100%，具有促细胞增殖作用，且与重组Ⅰ型胶原蛋白的浓度呈正相关；3组水凝胶溶血率均<5%。qPCR显示HSF光老化模型中，与模型组相比，3个浓度的水凝胶组细胞中Bcl-2和TGF-β1显著升高( P<0.05)，Caspase-3和Caspase-9显著下调( P<0.05)，细胞凋亡程度显著降低。MMP-9基因水平下调( P<0.05)，Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和Vimentin基因显著上调( P<0.05)。光老化小鼠模型中，与模型组相比，水凝胶组的小鼠皮肤形成的皱纹更少。HE染色显示胶原蛋白纤维表达量丰富且紧密、角质层更加光滑；与模型组相比，GEL-Ⅰ能更好地降低活性氧含量，提高SOD活性，降低MDA表达( P<0.05)，且呈浓度依赖性趋势，40 mg/ml组与对照组相比活性氧、SOD水平差异有统计学意义( P<0.05)；天狼猩红染色显示水凝胶组组织中胶原蛋白含量显著增加( P<0.05)，40 mg/ml组与对照组相比胶原含量显著增加( P<0.05)；免疫荧光染色显示肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、基质金属蛋白酶-9含量呈显著下降( P<0.05)，且呈浓度依赖性。 结论:重组Ⅰ型胶原水凝胶可改善氧化应激和炎症微环境，降低皮肤组织活性氧，下调促HSF凋亡细胞因子和基质金属肽酶9，促进皮肤光老化细胞的功能恢复，提升细胞外基质成分表达，可有效改善光损伤皮肤。

目的:探讨丹参来源的Sal-miR-58对人胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响及其分子机制。方法:分别采用体外合成的不同浓度的miR-Ctl和Sal-miR-58模拟物处理胶质瘤U251细胞，再给予X线照射。MTT检测Sal-miR-58对U251细胞活力的影响。Hoechst33342/碘化丙啶（PI）双染检测Sal-miR-58对照射后胶质瘤U251细胞凋亡的影响。2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）探针检测Sal-miR-58联合照射对肿瘤细胞活性氧含量的影响。克隆形成实验检测Sal-miR-58联合照射对U251细胞放射敏感性的影响。蛋白质印迹法检测Sal-miR-58调控抗凋亡蛋白造血细胞特异性蛋白1-相关蛋白X-l（HAX1）及凋亡标志蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、活化的胱天蛋白酶（Cleaved-Caspase）9、Cleaved-Caspase 3的表达情况。多组间比较行单因素方差分析，两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:Sal-miR-58能加重照射后U251细胞增殖的抑制（ P<0.05）。Sal-miR-58促进U251细胞凋亡，并且增加照射后U251细胞活性氧的产生（ P<0.05）。克隆形成实验显示，Sal-miR-58增加U251细胞放射敏感性，放射增敏比为1.43。蛋白质印迹法结果显示，Sal-miR-58抑制放射诱导的U251细胞HAX1表达，且Sal-miR-58能通过阻抑HAX1表达进而抑制Bcl-2表达，促进Caspase 9及Caspase 3的活化。 结论:Sal-miR-58具有增强U251细胞放射敏感性的作用，其可能机制是Sal-miR-58通过下调射线诱导的HAX1表达，促进肿瘤细胞的凋亡。

目的:探讨前B淋巴细胞白血病转录因子(PBX1)基因表达对肺癌细胞凋亡、ROS含量和STAT3信号通路的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肺癌及癌旁组织中PBX1基因的表达水平，分析PBX1基因表达水平与患者临床病理特征的关系。采用Western blot法检测人肺癌A549、SPC-A1、SK-MES-1和H1299细胞株中PBX1蛋白的表达水平。应用脂质体法转染空白对照(空白组)、阴性对照(阴性组)和PBX1小干扰RNA(siPBX1组)至A549细胞，采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率和ROS含量，采用Western blot检测各组细胞中PBX1、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Bcl-2和survivin蛋白的表达水平。结果:肺癌组织中PBX1信使RNA的表达水平(2.36±0.23)高于癌旁组织(1.02±0.15)，差异有统计学意义( P<0.05)。PBX1基因表达水平与肺癌分化程度、淋巴结转移和TNM分期均有关(均 P<0.05)。PBX1蛋白在人肺癌A549、SPC-A1、SK-MES-1和H1299细胞中的表达水平分别为0.454±0.038、0.403±0.034、0.311±0.028和0.377±0.035，与人正常肺MRC-5细胞(0.041±0.007)比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。转染PBX1 siRNA的A549细胞中，PBX1蛋白的表达水平(0.082±0.010)低于空白组(0.704±0.065)，差异有统计学意义( P<0.05)。siPBX1组细胞的凋亡率和ROS含量分别为(30.78±3.64)%和51.55±5.03，与空白组[分别为(3.92±0.27)%和22.36±1.31]比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。p-STAT3、Bcl-2和survivin蛋白的表达水平分别为0.051±0.006、0.202±0.018和0.068±0.008，与空白组(分别为0.172±0.010、0.425±0.041和0.196±0.021)比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:抑制PBX1基因的表达可诱导肺癌细胞凋亡，其机制可能与ROS产生和STAT3信号的下调有关。

目的:探讨中心静脉-动脉二氧化碳分压差（GAP）联合GAP与动脉-中心静脉氧含量差比值（GAP比值）在脓毒性休克患者早期预后评估中的价值。方法:选取2018年1月至2022年4月宁波市医疗中心李惠利医院收治的571例脓毒性休克患者进行回顾性分析，根据入院时的GAP和GAP比值分为4组，其中A组（180例）：GAP≤6 mmHg（1 mmHg=0.133kPa）且GAP比值≤1.8，B组（35例）：GAP>6 mmHg且GAP比值≤1.8，C组（113例）：GAP≤6 mmHg且GAP比值>1.8，D组（243例）：GAP>6 mmHg且GAP比值>1.8。根据患者28 d的转归情况分为存活组（339例）和死亡组（232例）。分析各组患者的基本资料、临床和预后指标，采用二元Logistic回归分析影响脓毒性休克患者预后的危险因素，绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析GAP联合GAP比值在脓毒性休克早期预后评估中的价值。结果:四组间乳酸、心排量（cardiac output, CO）、血管活性药物评分（vasoactive-inotropic score, VIS）、急性生理与慢性健康评分（APACHE-Ⅱ）、序贯器官衰竭评分(SOFA)、拔管率和28 d病死率差异均有统计学意义（ Z=18.89， F=101.29， Z=131.58， F=24.19， F=24.82， χ2=197.19， χ2=191.58；均 P<0.001）。A组与C组的CO分别为（5.2±1.5）L/min和（4.8±1.5）L/min，均高于D组，差异均有统计学意义（ t=15.87和13.80,均 P<0.001）；D组的VIS、APACHE-Ⅱ、SOFA和28 d病死率分别为20.8（10.9, 33.5）分、（23.8±9.1）分、（13.4±7.0）分和72.0%，均高于其他三组，差异均有统计学意义（ Z=11.76、5.46和5.41； t=8.21、3.70和3.86； t=8.54、3.69和4.46； χ2=191.05、37.38和42.34；均 P<0.05）；D组的拔管率为24.7%，低于其他三组，差异均有统计学意义（ χ2=172.55、47.56和56.92，均 P<0.001）。二元Logistic回归分析显示乳酸、VIS、GAP和GAP比值是患者死亡的独立危险因素，风险比（ OR）值分别为1.14、1.12、1.42和6.51。ROC曲线分析中发现，GAP约登指数为0.53，预测脓毒性休克患者死亡的曲线下面积（AUC）为0.84（95% CI：0.81~0.88），最佳临界值为6.48 mmHg时，敏感性76.3%，特异度76.4%；GAP比值约登指数为0.62，其AUC为0.88（95% CI：0.86~0.91），最佳临界值为2.11时，灵敏度76.3%，特异性85.8%。GAP联合GAP比值的约登指数为0.70，具有良好的预测价值，其AUC为0.94（95% CI：0.92~0.96），灵敏度83.2%，特异性86.7%。 结论:GAP联合GAP比值在脓毒性休克患者早期预后评估中具有良好的临床应用价值。

目的:研究人增生性瘢痕与正常皮肤组织成纤维细胞中氧化应激程度及相关通路的表达是否存在差异。方法:选取并收集2019年6月至2020年7月期间就诊于解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部接受手术切除治疗的8例增生性瘢痕患者的瘢痕组织及供皮区正常全层皮肤组织，其中男5例，女3例，年龄(35.0±11.7)岁。组织块法提取培养原代成纤维细胞，并传代培养，待细胞传代至第3代进行以下实验：(1)CCK-8法检测增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)和正常皮肤成纤维细胞(NSF)的增殖能力；(2)流式细胞术检测HSF和NSF中活性氧含量；(3)比色法检测2种细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)相对活力值；(4)RT-PCR检测2种细胞中NQO1基因表达量；(5)RT-PCR检测2种细胞中Nrf2基因表达量；(6)蛋白质印迹法检测2种细胞中Nrf2和Bcl2蛋白含量；(7)细胞免疫组织化学染色检测Nrf2在2种细胞中的表达分布情况。结果采用SPSS 25.0统计软件分析，行独立样本 t检验， P<0.05表示差异有统计学意义。 结果:(1)与NSF比较，HSF的生长速度更快，2种细胞的细胞数量从第3天起差异有统计学意义(统计结果从3～7 d依次为 t＝2.631， P＝0.039； t＝7.025， P<0.001； t＝5.031, P<0.001； t＝4.241, P＝0.002； t＝6.525, P＝0.003)；(2)HSF组中活性氧含量为75.39%±3.06%，明显高于NSF组的45.36%±3.66%，两者比较差异有统计学意义( t＝-17.804, P<0.001)；(3)HSF组SOD活力值为(50.76±0.52) U/ml，比NSF组的(42.76±1.35) U/ml升高，两者比较差异有统计学意义( t＝15.674， P<0.001)；(4)HSF组中NQO1 mRNA相对表达量为0.859±0.076，比NSF组的1.595±0.181降低，两者比较差异有统计学意义( t＝3.763， P＝0.020)；(5)HSF组中Nrf2 mRNA相对表达量为0.590±0.055，相较于NSF组的1.595±0.146降低，两者比较差异有统计学意义( t＝6.445， P＝0.003)；(6)HSF组的Nrf2蛋白相对含量为0.314±0.035，相较于NSF组的0.912±0.039明显降低，两者比较差异有统计学意义( t＝22.554， P<0.001)；HSF组的Bcl2蛋白相对含量为0.466±0.020，相较于NSF组的0.734±0.066明显降低，两者比较差异有统计学意义( t＝7.780， P<0.001)；(7)NSF和HSF细胞中均发现有Nrf2蛋白表达，且细胞核与细胞质中均有蛋白分布。 结论:HSF的氧化应激程度较高，可能是某些原因导致Nrf2含量降低，造成各种抗氧化酶表达降低，最终使活性氧蓄积导致。HSF的增殖和凋亡能力均强于NSF，而活性氧可以导致细胞凋亡，说明氧化应激增强可能是增生性瘢痕的发病机制之一。

目的:探讨钠钙交换体（NCX）抑制剂苄普地尔对黑色素瘤细胞增殖、迁移及凋亡的影响及可能的调控机制。方法:收集2023年1 - 12月就诊于中国医学科学院皮肤病医院且组织病理学诊断为色素痣及黑色素瘤患者的组织蜡块各3份，采用免疫组化染色检测组织中NCX1的表达，Western印迹验证NCX1在原代黑色素细胞及黑色素瘤细胞系A375、A875、SK-MEL-28、M14、MV3及SK-MEL-5细胞中的表达情况。采用细胞计数试剂盒8（CCK8）检测不同浓度苄普地尔对黑色素瘤细胞活力的影响，绘制增殖曲线并计算半数抑制浓度（IC50）。采用IC50浓度苄普地尔处理A375及SK-MEL-28细胞后，使用Fluo-4钙离子检测试剂盒检测细胞内钙离子水平，Transwell法和流式细胞仪分别检测黑色素瘤细胞A375、SK-MEL-28及A2058细胞迁移能力及凋亡情况。通过转录组测序、基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析苄普地尔处理对A375细胞中基因表达及通路的影响。采用流式细胞仪检测苄普地尔处理后黑色素瘤细胞内活性氧含量，Western印迹检测内质网应激及线粒体凋亡通路相关分子的表达。两组间比较采用 t检验。 结果:免疫组化检测显示，黑色素瘤组织中NCX1的表达（0.320 ± 0.020）高于色素痣组织（0.235 ± 0.008， t = 4.04， P = 0.016）；Western印迹实验显示，各黑色素瘤细胞系中NCX1蛋白条带灰度均深于原代黑色素细胞中NCX1蛋白条带。CCK8实验显示，随苄普地尔浓度增加黑色素瘤细胞活力逐渐降低。采用IC50浓度（25 μmol/L）的苄普地尔处理后，A375和SK-MEL-28细胞荧光强度（64.82 ± 2.98、75.84 ± 2.07）均高于相应对照组（37.10 ± 2.33、66.54 ± 1.47，均 P < 0.05），A375、SK-MEL-28和A2058细胞的迁移能力（103.00 ± 9.07、67.33 ± 7.22、61.33 ± 1.76）均低于相应对照组（400.00 ± 25.17、276.70 ± 14.63、116.00 ± 10.69，均 P < 0.05），其细胞凋亡率（5.72% ± 0.06%、13.58% ± 0.86%、25.76% ± 1.95%）均高于相应对照组（3.99% ± 0.50%、6.47% ± 0.88%、8.01% ± 0.36%，均 P < 0.05）。转录组测序显示，苄普地尔处理A375细胞后119个基因上调，164个基因下调，其中差异表达基因主要与代谢相关通路、内质网应激、肿瘤相关通路有关。活性氧检测显示，苄普地尔处理A375、SK-MEL-28及A2058后活性氧水平（1 907 ± 33、7 607 ± 535、3 380 ± 300）均高于对照组（1 646 ± 16、4 386 ± 163、2 110 ± 66，均 P < 0.05）。Western印迹实验显示，苄普地尔处理A375及SK-MEL-28后，C/EBP同源蛋白（CHOP）、活化转录因子4（ATF4）的表达高于对照组；采用苄普地尔及钙离子拮抗剂BAPTA处理A375和SK-MEL-28后，细胞内CHOP及ATF4的表达低于单独使用苄普地尔组。 结论:NCX抑制剂苄普地尔可增加黑色素瘤细胞内Ca 2+含量，抑制黑色素瘤细胞增殖及迁移，促进黑色素瘤细胞凋亡，该过程可能与内质网应激等生物学过程密切相关。