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我国北方地区鲤浮肿病毒的流行情况调查与监测分析
编辑人员丨2023/8/6
为进一步确认及掌握鲤浮肿病毒(Carp Edema Virus,CEV)目前的流行现状和流行特点,于2017年重点调查了我国北方地区5省市26个正发生或曾经发生"鲤急性烂鳃病"的养殖场,随机监测了9个省市的97家鲤和锦鲤养殖场.样品采用实时荧光定量PCR(Quantitative real time PCR,qPCR)法和套式PCR(Nest PCR)方法进行检测,nest PCR法扩增出的产物进行测序和基因分析.结果重点调查的26家养殖场中有20个为CEV阳性,1个为锦鲤疱疹病毒(Koi Herpes Virus,KHV)阳性,1个为孢子虫感染.随机调查的97家养殖场中有50家为CEV检测阳性,阳性率高达52％;可测序的CEV毒株均属于GenogroupⅡa型;样品按不同地区、不同采样水温、不同品种、不同规格鱼等划分,各组均有CEV阳性检出,但检出率均无显著差异.以上结果表明CEV感染是多省市"鲤急性烂鳃病"暴发的主要病因.另外,该病毒病的流行水温在12—27℃.
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编辑人员丨2023/8/6
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鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立
编辑人员丨2023/8/6
为了建立可同时检测鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)和锦鲤疱疹病毒(Kio herpesvirus,KHV)的检测方法,本研究根据CEV P4a基因保守序列,对英国环境、渔业水产养殖研究中心(Center for Environment,Fisheries and Aquaculture Science,CEFAS)设计合成的引物序列进行优化,合成1对特异性引物和1条用FAM荧光基团标记的TaqMan探针;根据KHV ORF7基因保守序列,设计筛选1对特异性引物和1条用VIC荧光基团标记的Taq-Man探针.优化反应条件,建立了CEV和KHV双重实时荧光定量PCR检测方法.结果显示该方法特异性强,与其它水生动物病毒无交叉反应;灵敏度高,对CEV和KHV的检测限均为15拷贝数/μL;组内重复与组间重复的平均变异系数小于3％.本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点,可用于CEV和KHV的快速检测.
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编辑人员丨2023/8/6
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鲤浮肿病毒Ⅱb基因亚型的鉴定
编辑人员丨2023/8/5
2018年6月,河南某鲤养殖场部分池塘暴发"鲤急性烂鳃病"疫情,发病水温25℃,死亡率为50％.从该养殖场分别采集发病鲤和无症状鲤共4个样品进行鱼体解剖、细菌和寄生虫检测、病理组织观察、PCR检测和系统进化分析.结果显示,发病鲤鱼体出血、头萎缩变形、吻端与鼻之间凹陷、头部骨骼不平整、体色发黑、鳃边发白坏死,肾脏肿大至鳔间隔;组织病理学检查可见鳃小片间隙及鳃小片顶端大量细胞增生,鳃丝呈棒状;病鱼体表和鳃中并未见任何寄生虫,细菌学检测也未分离到任何与鲤烂鳃病相关的病原菌;Real-time PCR和nested PCR方法从发病鲤和无症状鲤中检出鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)核酸阳性;基于CEV P4a的357 bp基因片段的遗传进化分析结果表明,本次试验检测到两种基因亚型CEV,从发病鲤中检出Ⅱa基因亚型CEV,从无症状鲤中检出Ⅱb基因亚型CEV,这是中国首次报道检出Ⅱb基因亚型CEV.
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编辑人员丨2023/8/5
