目的:探讨微小RNA(miR)-4317通过锌指蛋白322(ZNF322)调控结肠癌细胞增殖和转移的分子机制。方法:选取2019年6月至2022年6月河南省人民医院收集的68例结肠癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析肿瘤组织和癌旁组织中miR-4317表达水平。人结肠癌细胞系SW1116分为miR对照组和miR-4317组，分别采用miRNA对照慢病毒和miR-4317过表达慢病毒感染建立稳转细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验、划痕实验和Transwell分析两组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-4317的靶蛋白；蛋白质免疫印迹分析肿瘤组织和细胞靶蛋白表达水平。组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中miR-4317表达水平(1.13±0.14)明显高于结肠癌组织(0.67±0.11)，差异有统计学意义( t＝21.120， P<0.05)。miR对照组细胞吸光度( A)值(2.00±0.08)明显高于miR-4317组(1.13±0.14)，差异有统计学意义( t＝15.780， P<0.05)。miR对照组细胞EdU阳性率[(89.38±3.64)%]明显高于miR-4317组[(73.03±4.24)%]，差异有统计学意义( t＝7.165， P<0.05)。miR对照组细胞划痕愈合率[(86.25±4.37)%]明显高于miR-4317组[(64.72±6.68)%]，差异有统计学意义( t＝6.606， P<0.05)。miR对照组细胞侵袭数量[(133.83±8.11)个]明显高于miR-4317组[(103.50±5.28)个]，差异有统计学意义( t＝7.877， P<0.05)。ZNF322是miR-4317的靶基因。癌旁组织中ZNF322表达水平(1.11±0.14)明显低于结肠癌组织(1.59±0.24)，差异有统计学意义( t＝14.320， P<0.05)。miR对照组细胞ZNF322表达水平(1.30±0.08)明显高于miR-4317组(0.74±0.12)，差异有统计学意义( t＝9.434， P<0.05)。 结论:miR-4317在结肠癌组织中呈低表达，通过调控下游蛋白ZNF322参与结肠癌细胞的增殖和转移过程。

目的 检测胃癌组织中微小RNA(miR)-133a-3p和miR-4317表达情况,并探究二者的临床意义.方法 收集60例胃癌患者的癌组织及其相对应的癌旁组织,采用实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)技术检测组织样品中miR-133a-3p和miR-4317表达水平,同时分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者临床特征之间的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者预后的关系.结果 RT-qPCR试验结果显示,胃癌组织中miR-133a-3p、miR-4317相对表达量均低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05).胃癌组织中miR-133a-3p表达水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);miR-4317表达水平与淋巴结转移、远处转移及肿瘤TNM分期有关(P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线显示,miR-133a-3p高表达胃癌患者的5年生存率高于低表达者,术后生存时间长于低表达者(P<0.05);miR-4317低表达胃癌患者的5年生存率低于高表达者,术后生存时间短于高表达者(P<0.05).结论 胃癌组织中miR-133a-3p和miR-4317均表现为低表达,二者有可能作为胃癌预测和预后判定的潜在标志物,为胃癌患者的预测和预后判定提供一定的参考价值.

目的:探讨胃癌组织中微小核糖核酸(miR)-203、miR-4317的表达情况及其临床意义.方法:选择2014年1月至2016年12月我院收治的胃癌患者92例,应用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测患者胃癌组织及其相应癌旁组织中miR-203、miR-4317的表达情况,分析miR-203、miR-4317表达与胃癌患者临床病理参数的关系,所有患者随访3年,根据miR-203、miR-4317在胃癌组织中的中位表达量将患者分为miR-203高表达组(49例)、miR-203低表达组(43例)、miR-4317高表达组(51例)、miR-4317低表达组(41例).分析miR-203、miR-4317与预后的关系及预后的影响因素.结果:胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量显著低于癌旁组织(P＜0.05).不同性别、年龄、肿瘤大小胃癌患者胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量比较无统计学差异(P＞0.05),中低分化、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移胃癌患者胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量显著低于高分化、TNM分期为Ⅰ?Ⅱ期、无淋巴结转移胃癌患者(P＜0.05).miR-203高表达组3年生存率显著高于miR-203低表达组(P＜0.05),miR-4317高表达组3年生存率显著高于miR-4317低表达组(P＜0.05).COX多因素分析显示,中低分化、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、miR-203低表达、miR-4317低表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P＜0.05).结论:胃癌组织中miR-203、miR-4317异常低表达,其水平与胃癌预后密切相关,且胃癌患者预后与分化程度、临床分期、淋巴结转移等相关.

目的:探讨miRNA调控食管癌细胞CaES-17的凋亡和增殖的潜在机制.方法:纳入2019年06月至2020年06月在我院接受治疗的食管癌患者6例,采集其食管癌组织和癌旁组织后抽取总RNA进行miRNA高通量测序.在食管癌细胞CaES-17中过表达食管癌组织和癌旁组织中的差异miRNA,检测食管癌细胞CaES-17的凋亡和增殖情况.通过TargentScan7.2在线分析和荧光素酶报告实验分析miRNA的靶标mRNA.结果:6例患者的食管癌组织和癌旁组织通过高通量测序发现hsa-miR-30d-5p、hsa-miR-6818-5p、hsa-miR-525-5p、hsa-miR-1909-3p、hsa-miR-212-5p、hsa-miR-586、hsa-miR-1286、hsa-miR-365b-3p、hsa-miR-30e-5p、hsa-miR-4317在食管癌组织和癌旁组织中的表达差异在8倍以上,并且食管癌组织均高于癌旁组织.干扰上述miRNA后,发现干扰miR-586能够抑制食管癌细胞CaES-17的增殖水平和迁移水平,提高凋亡水平.过表达miR-586后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平下降,增殖水平和迁移水平上升.TargentScan7.2在线分析和荧光素酶报告实验发现miR-586靶向TLR7的3'端非编码区.敲低TLR7后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平下降,增殖水平和迁移水平上升.过表达TLR7后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平上升,增殖水平和迁移水平下降.但是,同时干扰miR-586和敲低TLR7后,相比于对照食管癌细胞,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平和增殖水平无显著差异.结论:miR-586通过靶向TLR7的3'端非编码区,降解了 TLR7的mRNA,抑制了 TLR7的蛋白翻译,最终抑制了食管癌细胞CaES-17的凋亡、促进了食管癌细胞CaES-17的增殖.

目的 探讨巴豆生物碱(crotonic alkaloids,CA)对结直肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制.方法 体外培养人结直肠癌细胞SW620,不同浓度的CA处理SW620细胞,脂质体转染法将miR-NC、miR-4317 mimics分别转染至SW620细胞,将anti-miR-NC、anti-miR-4317分别转染至SW620细胞后加入100μg/ml巴豆生物碱处理24 h;MTT实验检测细胞增殖;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miR-4317的表达量.结果 CA处理SW620细胞后,miR-4317的表达量和细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞克隆形成数减少(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染miR-4317 mimics后,细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞克隆形成数减少(P<0.05);转染anti-miR-4317可降低CA对SW620细胞增殖及凋亡的作用.结论 巴豆生物碱可通过上调miR-4317的表达而抑制结直肠癌细胞增殖并可诱导细胞凋亡.