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目的培养原代嗅球及皮层神经元细胞,研究神经轴突生长诱向因子(Netrin-4)受体在神经元细胞中的定位.方法改良Koh法分离、培养出生12 h内Wistar乳鼠的嗅球及皮层神经元,采用免疫细胞化学方法鉴定其纯度.碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4融合蛋白与原代培养第7 d的神经元孵育,以亲和细胞化学法检测Netrin-4受体在神经元的定位.结果原代培养第7 d的嗅球及皮层神经元胞体饱满,突起长并交织成网状;免疫细胞化学染色见神经丝蛋白(neurofilament)在神经元胞体及突起中表达;嗅球及皮层神经元的细胞膜上均有Netrin-4受体表达.结论建立起高效、稳定的原代神经元培养方法并应用于神经突起生长诱向因子受体的定位研究.
作者:余科科;张成岗;汪思应
来源:安徽医科大学学报 2004 年 39卷 6期
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