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目的：真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒( VZV)糖蛋白E( gE)的胞外域基因,应用gE抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。方法构建含有VZV gE胞外域基因的真核表达质粒pCDNA3．1-gE,测序后脂质体转染 COS-7细胞,经 G418筛选出稳定表达VZV gE的细胞株。采用RT-PCR法检测VZV gE的mRNA, Western blot和间接免疫荧光法检测gE的免疫反应性,表达产物经Ni2+-NTA柱纯化后包被ELISA板,对127份0~10岁正常儿童血清中VZV-IgG抗体水平进行检测。结果成功筛选出能够稳定表达VZV gE胞外域基因的COS-7细胞株,RT-PCR检测到gE的mRNA,经Western blot和间接免疫荧光鉴定,gE具有明显的免疫反应性,COS-7细胞株和其培养上清液中均有gE融合蛋白,表达量约为0．632 mg/ml,纯度约为90
作者：伊兴旭；陈敬贤；甘霖；王明丽
来源：安徽医科大学学报 2015 年 3期
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