目的：利用慢病毒载体，构建乳腺癌MCF-7高表达FoxA1细胞株，并初步探究FoxA1对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡的影响。方法将FoxA1基因重组构建慢病毒载体穿梭质粒EX-Z1010-LV201，经PCR和测序后在脂质体Lipo-fectamine2000介导下转染293T细胞包装慢病毒，嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞， Real-Time PCR 法检测稳定转染MCF-7细胞株中FoxA1基因的表达水平， MTT及流式细胞术对比高表达FoxA1细胞株与对照细胞株增殖凋亡差异。结果 PCR扩增和测序结果证实成功构建FoxA1慢病毒载体并包装慢病毒，成功筛选出FoxA1高表达的乳腺癌MCF-7细胞系。 MTT及流式细胞术结果显示：与对照组比较，上调FoxA1乳腺癌MCF-7细胞株增殖下降，凋亡率增加。结论成功构建了重组慢病毒载体，并筛选出稳定高表达FoxA1的MCF-7细胞株，FoxA1可能参与了乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡调控，为下一步进行其机制探讨提供了依据。
作者：郑璐；汤铜；钱波；周连帮；万圣云；张磊；史加宁；李佳
来源：安徽医科大学学报 2016 年 51卷 6期
