目的 体外观察环孢素A(CsA)抑制软骨细胞线粒体自噬后对骨关节炎(OA)相关蛋白基质金属蛋白酶1(MMP-1)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达的影响.方法 分离、培养临床上诊断为OA患者的膝关节软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色法对软骨细胞进行鉴定.以白介素-1β(IL-1β)刺激软骨细胞及CsA抑制线粒体自噬,分为只加培养基的空白对照组、混有IL-1β的培养基组、混有IL-1β+ CsA的培养基组.用Mitotracker DeepRed (MTR)标记线粒体与Lysotracker green (LTG)标记自噬体的免疫荧光共定位以及Tom20蛋白表达量检测线粒体自噬水平;用Real-timePCR和Western blot法分别检测软骨细胞中MMP-1、MMP-13的mRNA和蛋白的表达.结果 IL-1β组较对照组MTR和LTG荧光共定位增加,线粒体外膜蛋白Tom20表达降低(P＜0.05),线粒体自噬增加,MMP-1、MMP-13的mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05).与IL-1β3组相比,IL-1β+CsA组MTR和LTG荧光共定位减少,Tom20蛋白表达增加(P＜0.05),线粒体自噬减少,MMP-1、MMP-13的mRNA和蛋白表达均增加(P＜0.05).结论 在体外CsA可以抑制软骨细胞线粒体自噬,抑制线粒体自噬使OA相关蛋白MMP-1和MMP-13的表达增加.
作者：丁振飞；常俊；黄威；曹乐；王涛；饶先亮；尹宗生
来源：安徽医科大学学报 2018 年 53卷 4期
