目的 探讨荧光聚合酶链反应(PCR)熔解曲线法在耐多药结核病(MDR-TB)的快速诊断和有效药物快速筛选中的应用价值.方法 以利福平(RFP)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)、氟喹诺酮类(FQs)为检测药物,应用熔解曲线法和微孔板药敏法,对比检测2021年1~7月贵阳市公共卫生救治中心罗氏固体培养阳性的84株菌株.两种方法药敏结果不一致的菌株用基因测序法作验证.结果 以微孔板法为标准,熔解曲线法对MDR-TB(微孔板诊断)的检出符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值依次为89.3%(75/84)、91.5%(43/47)、86.5%(32/37)、89.6%(43/48)、88.9%(32/36)、0.78.溶解曲线法对RFP、INH、EMB、FQs的检出符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值分别为76.2%~97.6%、86.7%~95.7%、73.9%~100%、41.9%~100%、94.1%~98.6%和0.45~0.95.对22份(26.19%,22/84)微孔板法敏感、熔解曲线法耐药的菌株进行测序验证,结果均显示含有耐药突变;而微孔板法耐药、熔解曲线法敏感的6份(0.71%,6/84)菌株在测序区域均为野生型.结论 荧光PCR熔解曲线法对微孔板药敏法检测结果的灵敏度、特异度、符合率、一致性均较高,可为耐多药结核病的初筛诊断及治疗方案制定提供实验室依据.
作者:秦万;王明栋;欧维正;徐勇
来源:安徽医学 2024 年 45卷 2期