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目的 探讨黏蛋白1(MUC1)基因小干扰RNA(siRNA)联合丙泊酚对肺癌H460细胞生长的抑制及可能的机制.方法 siRNA干扰人肺癌H460细胞株MUC1基因,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)法检测转染效果;以不同浓度的丙泊酚干预H460细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测丙泊酚对H460细胞活力的影响,筛选丙泊酚作用浓度;实验分为转染对照(si-NC)组、转染MUC1 siRNA(si-MUC1)组、丙泊酚干预(Propofol)组和转染MUC1 siRNA联合丙泊酚干预(si-MUC1+Propofol)组;采用CCK-8检测H460细胞增殖情况,克隆形成实验分析H460细胞克隆形成能力,Western blotting检测H460细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平.结果 si-NC组和si-MUC1组细胞中MUC1 mRNA的表达分别为:(1.00±0.10)、(0.18±0.02),MUC1蛋白表达分别为:(0.56±0.06)、(0.21±0.02),转染MUC1 siRNA的H460细胞中MUC1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(t=24.122,P<0.001,t=16.602,P<0.001);不同浓度的丙泊酚对H460细胞有不同程度的抑制作用,并筛选出半数致死浓度55.96μmol/L的丙泊酚用于后续实验;si-NC组、si-MUC1组、Propofol组和si-MUC1+Propofol组细胞克隆形成数分别为:(

作者:陆巍;王飞;梁柳芬

来源:安徽医药 2021 年 25卷 3期

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作者:
陆巍;王飞;梁柳芬
来源:
安徽医药 2021 年 25卷 3期
标签:
肺肿瘤 肿瘤细胞,培养的 MUC1基因 丙泊酚 肺癌细胞 生长 Akt信号通路
目的 探讨黏蛋白1(MUC1)基因小干扰RNA(siRNA)联合丙泊酚对肺癌H460细胞生长的抑制及可能的机制.方法 siRNA干扰人肺癌H460细胞株MUC1基因,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)法检测转染效果;以不同浓度的丙泊酚干预H460细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测丙泊酚对H460细胞活力的影响,筛选丙泊酚作用浓度;实验分为转染对照(si-NC)组、转染MUC1 siRNA(si-MUC1)组、丙泊酚干预(Propofol)组和转染MUC1 siRNA联合丙泊酚干预(si-MUC1+Propofol)组;采用CCK-8检测H460细胞增殖情况,克隆形成实验分析H460细胞克隆形成能力,Western blotting检测H460细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平.结果 si-NC组和si-MUC1组细胞中MUC1 mRNA的表达分别为:(1.00±0.10)、(0.18±0.02),MUC1蛋白表达分别为:(0.56±0.06)、(0.21±0.02),转染MUC1 siRNA的H460细胞中MUC1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(t=24.122,P<0.001,t=16.602,P<0.001);不同浓度的丙泊酚对H460细胞有不同程度的抑制作用,并筛选出半数致死浓度55.96μmol/L的丙泊酚用于后续实验;si-NC组、si-MUC1组、Propofol组和si-MUC1+Propofol组细胞克隆形成数分别为:(

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