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原核表达重组质粒p3MH/P140?Fd,在E.coli XLI-Blue菌中获得了成功表达,利用重组蛋白中的6个组氨酸(His)组成的"标签"进行亲和层析,对表达产物进行纯化.SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot的检测结果证明,纯化得到的分子量约47kD蛋白是鼠源性的Fab抗体,ELISA检测结果证明,P140Fab抗体与人血小板能特异性结合.体外二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集抑制试验证明,P140Fab抗体对血小板的聚集有抑制作用,并且具有剂量抑制效应,IC50的平均值为16.85mg/L.

作者:杨永昌;王北宁;赖春宁;黎燕

来源:标记免疫分析与临床 2008 年 15卷 3期

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作者:
杨永昌;王北宁;赖春宁;黎燕
来源:
标记免疫分析与临床 2008 年 15卷 3期
标签:
血小板 单克隆抗体 蛋白纯化 生物活性
原核表达重组质粒p3MH/P140?Fd,在E.coli XLI-Blue菌中获得了成功表达,利用重组蛋白中的6个组氨酸(His)组成的"标签"进行亲和层析,对表达产物进行纯化.SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot的检测结果证明,纯化得到的分子量约47kD蛋白是鼠源性的Fab抗体,ELISA检测结果证明,P140Fab抗体与人血小板能特异性结合.体外二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集抑制试验证明,P140Fab抗体对血小板的聚集有抑制作用,并且具有剂量抑制效应,IC50的平均值为16.85mg/L.

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