目的 建立新生C57乳鼠心肌细胞和成纤维细胞体外原代培养和共培养体系,探讨不同日龄乳鼠心脏细胞的体外增殖特征.方法 分离不同日龄C57新生小鼠的心肌细胞和成纤维细胞,分别进行原代培养和共培养,观察细胞的形态和活力变化,测定CyclinD1、CDK4、GATA4、Nkx2.5以及FGF1的表达.结果 差速贴壁90 min后成纤维细胞先贴壁,培养12h后心肌细胞几乎全部贴壁;共培养心肌细胞多以细胞团的形式贴壁生长.出生5d以内的乳鼠心肌细胞数量明显增加,共培养的心肌细胞活力更大、增殖速度快;出生5d以后乳鼠的心肌细胞数量变化并不明显.出生5d内乳鼠心肌细胞中CyclinD1和CDK4的表达量较高,且共培养的心肌细胞表达量要高于单独培养的心肌细胞表达量.GATA4、Nkx2.5和FGF1的表达随日龄增大而增加.结论 成功建立了新生小鼠心肌细胞和成纤维细胞的体外共培养体系;出生5d内的乳鼠心肌细胞体外培养时具有较强的增殖能力,且成纤维细胞能促进心肌细胞的增殖,GATA4、Nkx2.5和FGF1有阻止心肌细胞增殖作用.出生5d后乳鼠的心肌细胞增殖能力减弱甚至消失.
作者：胡金莲；郑怡文；谷晓蕾；陆国才
来源：北京医学 2015 年 37卷 5期
