目的:探讨慢病毒靶向介导技术沉默 P27RF-Rho 基因,阐述其对肝癌细胞侵袭性的影响。方法:构建P27RF-Rho RNAi慢病毒。慢病毒感染肝癌细胞 BEL7402。实验分为 P27RF-Rho-siRNA 实验组、Scramble-siRNA阴性对照组和BEL7402空白对照组。Western bloting法检测P27RF-Rho基因沉默效果及肝癌相关蛋白 RhoA、RhoC、VEGF、P53和PTEN表达水平;明胶酶谱分析肿瘤侵袭相关基质金属蛋白酶(MMPs)活性;细胞划痕和体外Transwell小室侵袭实验比对细胞迁移和侵袭能力的改变。结果:Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA实验组BEL7402中P27RF-Rho、RhoA、RhoC和 VEGF蛋白表达水平明显低于2个对照组(P<0.05),P53和 PTEN表达水平高于2个对照组(P<0.05)。明胶酶谱,P27RF-Rho-siRNA实验组MMPs活性明显降低(P<0.01)。划痕实验,P27RF-Rho-siRNA 实验组细胞迁移距离明显低于2个对照组(P<0.01)。实验组穿过Transwell小室的平均细胞数明显少于2个对照组(P<0.01)。结论:沉默 P27RF-Rho基因可以降低肝癌细胞BEL7402的侵袭和迁移能力。
作者:马强;谢淑丽;王广义;邢光远;杨耀群;吕国悦
来源:吉林大学学报(医学版) 2016 年 42卷 2期