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目的:探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在正常小鼠卵巢和多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织中的差异表达,阐明 CaMKⅡ对 PCOS 小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法:用蓖麻油溶解脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射诱导PCOS小鼠模型(PCOS组),对照组小鼠注射等体积蓖麻油,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组小鼠血清中睾酮水平,阴道涂片监测2组小鼠发情周期变化,HE染色观察2组小鼠卵巢组织病理形态表现,免疫荧光染色法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ蛋白定位和荧光强度,Western blotting法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平.采用短发夹RNA(sh-RNA)-CaMKⅡ慢病毒转染人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)建立稳转体系,分为空白对照组、sh-CaMKⅡ-1 组和sh-CaMKⅡ-2组,Western blotting法检测各组 KGN 细胞中 CaMKⅡ和 Caspase-3 蛋白表达水平.结果:与对照组比较,PCOS组小鼠血清中总睾酮和游离睾酮水平明显升高(P<0.01),发情周期紊乱,停滞于发情中期,卵巢组织中出现颗粒细胞层数较少的空泡状卵泡,表明PCOS小鼠模型建立成功.CaMKⅡ蛋白在小鼠卵巢组织的卵母细胞、颗粒细胞和间质细胞中均有表达;与对照组比较,PCOS组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ荧光强度和蛋白表达水平明显降低(P<0.

作者:谢贤国;马亚博;徐娅秀;张燕;杜长征;徐金瑞;杨易

来源:吉林大学学报(医学版) 2023 年 49卷 4期

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作者:
谢贤国;马亚博;徐娅秀;张燕;杜长征;徐金瑞;杨易
来源:
吉林大学学报(医学版) 2023 年 49卷 4期
标签:
钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 多囊卵巢综合征 动物模型 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 Calmodulin-dependent protein kinases Ⅱ Polycystic ovary syndrome Animal model Cysteinyl aspartate specific proteinase-3
目的:探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在正常小鼠卵巢和多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织中的差异表达,阐明 CaMKⅡ对 PCOS 小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法:用蓖麻油溶解脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射诱导PCOS小鼠模型(PCOS组),对照组小鼠注射等体积蓖麻油,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组小鼠血清中睾酮水平,阴道涂片监测2组小鼠发情周期变化,HE染色观察2组小鼠卵巢组织病理形态表现,免疫荧光染色法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ蛋白定位和荧光强度,Western blotting法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平.采用短发夹RNA(sh-RNA)-CaMKⅡ慢病毒转染人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)建立稳转体系,分为空白对照组、sh-CaMKⅡ-1 组和sh-CaMKⅡ-2组,Western blotting法检测各组 KGN 细胞中 CaMKⅡ和 Caspase-3 蛋白表达水平.结果:与对照组比较,PCOS组小鼠血清中总睾酮和游离睾酮水平明显升高(P<0.01),发情周期紊乱,停滞于发情中期,卵巢组织中出现颗粒细胞层数较少的空泡状卵泡,表明PCOS小鼠模型建立成功.CaMKⅡ蛋白在小鼠卵巢组织的卵母细胞、颗粒细胞和间质细胞中均有表达;与对照组比较,PCOS组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ荧光强度和蛋白表达水平明显降低(P<0.

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