目的:探究miR-499a-5p与TLR2的靶向关系,及其对缺氧/复氧(A/R)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡的影响.方法:培养H9c2细胞并分为模型组和对照组,对照组在常氧条件下培养,模型组为缺氧/复氧模型,并进一步分为miR-NC组、miR-499a-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-499a-5p组、miR-499a-5p+pGL3-Basic组和miR-499a-5p+pGL3-Basic+TLR2组;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;qRT-PCR检测miR-499a-5p和TLR2 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测TLR2、B淋巴细胞瘤因子2XL(Bcl-xL)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;双荧光素报告基因检测验证miR-499a-5p与TLR2的靶向关系.结果:与对照组相比,模型组中miR-499a-5p表达降低,TLR2表达升高(P<0.05);过表达miR-499a-5p可降低A/R模型心肌细胞凋亡和氧化应激作用,并靶向抑制TLR2;过表达TLR2逆转了miR-499a-5p对A/R模型心肌细胞抗凋亡及降低氧化应激的作用.结论:miR-499a-5p可能通过靶向抑制TLR2的激活,降低心肌细胞凋亡率及氧化应激反应,发挥保护心肌细胞的作用.
作者：杨伟；王雁；李俊杰；王燕琼；陈文栋
来源：川北医学院学报 2022 年 37卷 10期
